Bioenno Lifesciences 是Bioenno Tech，LLC的子公司  。Bioenno Lifesciences成立于2010年，在美國(guó)加利福尼亞州圣安娜市建立了研究，工程和制造設(shè)施。自2011年以來(lái)，我們一直為醫(yī)學(xué)界提供業(yè)界的神經(jīng)科學(xué)研究醫(yī)療包，并積極開(kāi)發(fā)新技術(shù)。我們?cè)鵀楣疳t(yī)學(xué)院，約翰霍普金斯大學(xué)，F(xiàn)DA，NIH，英國(guó)倫敦國(guó)王學(xué)院，德國(guó)科隆大學(xué)和法國(guó)INSERM等組織的客戶群提供服務(wù)。

品牌：Bioenno

貨號(hào)：003760

品名：sliceGolgi Kit （sliceGolgi試劑盒）

產(chǎn)品特點(diǎn)：

在自由浮動(dòng)切片/切片上進(jìn)行高爾基染色 

Bioenno  也在銷售sliceGolgi  試劑盒，并增加  了  固色劑 套裝。該  sliceGolgi 套件的設(shè)計(jì)上運(yùn)行的片/段高爾基染色。浸漬和染色可以在自由浮動(dòng)部分（50?400微米厚度）上進(jìn)行。額外的   固色劑套裝使用Bioenno的醛來(lái)處理額外的樣品。  

該試劑盒已經(jīng)在來(lái)自大鼠和小鼠的許多類型的腦切片中進(jìn)行了廣泛的測(cè)試，它們是：

• 新鮮切片，例如使用組織切碎機(jī)快速制備的急性切片。

• 器官切片培養(yǎng)物，  例如培養(yǎng)的海馬切片和培養(yǎng)的皮層切片。

• 已經(jīng)完成電生理記錄和/或藥物施用的人造腦脊液（ACSF） - 切片。

• 用Bioenno醛  固定劑（產(chǎn)品目錄號(hào)：003780）通過(guò)灌注或浸泡固定大腦的切片。固定的大腦可以在室溫（RT，15至25攝氏度）下在50?400微米處系統(tǒng)切片，并且切片可以單獨(dú)進(jìn)行高爾基染色，單獨(dú)的免疫組織化學(xué)/免疫細(xì)胞化學(xué)（ICC）或組合的高爾基染色和ICC 。

• 額外的固色劑 套件允許處理更多的樣品。Bioenno建議購(gòu)買(mǎi)固定試劑盒的sliceGolgi試劑盒。

所述  sliceGolgi套件 可以被施加到視網(wǎng)膜，脊髓，和培養(yǎng)的細(xì)胞以染色神經(jīng)元過(guò)程。

所述sliceGolgi套件產(chǎn)生樹(shù)突和棘（參見(jiàn)圖）的兩個(gè)可靠和高質(zhì)量的標(biāo)記。神經(jīng)元浸漬在50至200微米厚的切片中  超快，僅在某些情況下2-3天。一般來(lái)說(shuō)，浸漬時(shí)間取決于部件的年齡和厚度，需要4-7天。該試劑盒可儲(chǔ)存在15-25ºC的黑暗環(huán)境中長(zhǎng)達(dá)12個(gè)月。

高爾基染色和免疫組化/免疫細(xì)胞化學(xué)（ICC）  

Bioenno Tech已經(jīng)成功地將sliceGolgi試劑盒與ICC一起用于同一腦部分（見(jiàn)圖4-9）。為了執(zhí)行組合的高爾基染色和ICC，固定切片首先經(jīng)歷高爾基染色，然后進(jìn)行ICC：

（1）組織處理：將  動(dòng)物心臟灌注生理鹽水，然后灌注由Bioenno Tech開(kāi)發(fā)的  固定劑 （目錄號(hào)：003780）。將大腦從顱骨上解剖并固定1-3天（4℃）。然后使用vibratome或類似類型的切片機(jī)/顯微鏡在RT下將腦部切成50?100微米厚。切片以0.1M PB（pH 7.4）收集并可以在緩沖液中儲(chǔ)存長(zhǎng)達(dá)一周（4℃）。

固定切片可用于單獨(dú)的高爾基染色，單獨(dú)的ICC，以及組合的高爾基染色和ICC。

（2）  高爾基染色：  在RT（15-25℃）使用sliceGolgi試劑盒 對(duì)自由浮動(dòng)切片進(jìn)行高爾基染色  。神經(jīng)元的浸潤(rùn)可能需要2-5天。

（3）  ICC：  自由浮動(dòng)部分可以采用標(biāo)準(zhǔn)的抗生物素蛋白 - 生物素復(fù)合物（ABC）方法。通過(guò)在含有H 2 O 2的3,3'-二氨基聯(lián)苯胺（DAB）中孵育切片可以使免疫反應(yīng)產(chǎn)物可視化。

注：  該  sliceGolgi套件 不適用于冷凍組織工作。切割前固定的組織塊不能冷凍。

產(chǎn)品功能

• 適用于切片/切片組織（厚度為50至400微米）
• 對(duì)自由浮動(dòng)部分進(jìn)行浸漬和染色
• 新型醛  固定劑 和增強(qiáng)浸漬液
• 神經(jīng)元的浸潤(rùn)很快（2-7天）
• 結(jié)合高爾基體染色和免疫組織化學(xué)
• 經(jīng)過(guò)驗(yàn)證的結(jié)果/用戶友好
• 足夠多達(dá)  1000個(gè)腦區(qū) （50-400微米厚，尺寸約1×1.5厘米）
• 用于體外實(shí)驗(yàn)室使用
• 專門(mén)的
• 12個(gè)月保修

使用sliceGolgi試劑盒證明的結(jié)果 （產(chǎn)品目錄號(hào)：003760）

• 經(jīng)過(guò)驗(yàn)證的結(jié)果使用sliceGolgi套件 

樹(shù)枝狀分支和刺已經(jīng)可靠地浸漬并用切片凝膠試劑盒染色。 

圖1 - 額皮質(zhì)層II中浸漬并染色的神經(jīng)元

所述sliceGolgi試劑盒 用于浸漬和染色神經(jīng)元中一日齡12（P12）C57BL小鼠的額皮質(zhì)。200微米厚的切片中的神經(jīng)元的樹(shù)突棘（箭頭）標(biāo)記良好。箭頭表示絲狀偽足突起，未成熟的刺。圖像是使用20x物鏡拍攝的。

圖2 - 新皮層第三層錐體神經(jīng)元的樹(shù)枝狀分支

使用sliceGolgi試劑盒 浸漬和染色位于20×物鏡的額頂皮質(zhì)運(yùn)動(dòng)區(qū)域的錐體神經(jīng)元的斜樹(shù)突和主枝（莖）。C57BL小鼠12天齡。

圖3 - 下丘腦外側(cè)的神經(jīng)元

所述sliceGolgi試劑盒 用于浸漬自由浮動(dòng)的條件下在100微米厚的切片的神經(jīng)元。從P12 C57BL小鼠的外側(cè)下丘腦區(qū)域采集具有軸突終端的染色的神經(jīng)元（20x物鏡）。在樹(shù)枝狀分支上發(fā)現(xiàn)許多絲狀偽足樣突起（箭頭）。

圖4 - 聯(lián)合使用sliceGolgi試劑盒和免疫組織化學(xué)/免疫細(xì)胞化學(xué)（ICC）

高爾基染色和ICC的組合允許同時(shí)觀察樹(shù)突棘和免疫反應(yīng)產(chǎn)物。通常，自由浮動(dòng)部分首先被處理用于高爾基染色，然后用于ICC。對(duì)于高爾基染色，通過(guò)升主動(dòng)脈用0.9％鹽水溶液灌注動(dòng)物，然后用新制備的固定劑（目錄號(hào)：003780，Bioenno Tech）灌注。將腦從顱骨上解剖并固定1-3天（4℃）。然后使用vibratome以50-100μm厚度切割腦，并將切片收集到0.1M PB（pH 7.4）中的組織培養(yǎng)孔中。該sliceGolgi套件（目錄號(hào)：003760）浸漬（2-5天，RT）并染色樹(shù)突（黑色）。為了執(zhí)行ICC，將自由浮動(dòng)切片進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)的抗生物素蛋白 - 生物素復(fù)合物（ABC）方法。通過(guò)將切片在含有0.01％H 2 O 2的 0.04％3,3'-二氨基聯(lián)苯胺（DAB）中溫育8-10分鐘來(lái)使免疫反應(yīng)產(chǎn)物可視化。使用4x物鏡從2個(gè)月大的C57小鼠的海馬中取得圖像。

圖5 - 在同一腦切片上進(jìn)行的高爾基染色和ICC

結(jié)合的高爾基染色和ICC：1）C57小鼠心臟灌注生理鹽水，然后用Bioenno開(kāi)發(fā)的醛固定劑 （目錄號(hào)：003780）。2）使用sliceGolgi試劑盒對(duì)自由浮動(dòng)切片（50微米）進(jìn)行高爾基染色。浸漬時(shí)間僅在22±1℃時(shí)為2天。3）使用標(biāo)準(zhǔn)的抗生物素蛋白 - 生物素復(fù)合物方法處理小白蛋白（PV）的ICC。單克隆小鼠抗PV抗體（1：20,000，MAB1572，Chemicon）的溫育時(shí)間在22±1℃過(guò)夜。使用4x物鏡從丘腦攝取圖像。

圖6。- 樹(shù)枝狀分支和PV-免疫陽(yáng)性神經(jīng)元

高爾基染色和ICC在相同的腦部分進(jìn)行。使用sliceGolgi試劑盒在自由浮動(dòng)部分（100μm）上進(jìn)行高爾基染色。浸漬時(shí)間為22±1℃3天。從4個(gè)月大的C57小鼠的下臂拍攝圖像（63倍物鏡）。

圖7 - 高爾基染色的樹(shù)突和免疫標(biāo)記的神經(jīng)元

所述sliceGolgi試劑盒用于浸漬和染色皮層神經(jīng)元的樹(shù)枝狀分支在皮層的層III。免疫反應(yīng)性神經(jīng)元在相同區(qū)域中顯現(xiàn)。從4個(gè)月大的C57小鼠拍攝圖像（63倍物鏡）。

圖8 - 高爾基染色的皮層神經(jīng)元和免疫標(biāo)記的神經(jīng)元

所述sliceGolgi試劑盒用于浸漬和染色神經(jīng)元的樹(shù)枝狀分支在皮質(zhì)的更深的層。僅在22±1℃時(shí)，100μm厚切片中神經(jīng)元的浸潤(rùn)需要2天。免疫反應(yīng)性神經(jīng)元在相同區(qū)域中顯現(xiàn)。該圖像是使用20x物鏡從2個(gè)月大的C57小鼠拍攝的。

圖9 - 在相同的腦切片上進(jìn)行高爾基染色和ICC

該sliceGolgi套件來(lái)標(biāo)記樹(shù)突分支。以20x物鏡顯示的頂部面板中的盒裝區(qū)域被放大（63x）以突出樹(shù)突棘（箭頭）和免疫標(biāo)記的神經(jīng)元（箭頭）。這些圖像取自2月齡C57BL小鼠的額頂皮層（體感區(qū)域）。

產(chǎn)品信息：

上海起發(fā)實(shí)驗(yàn)試劑有限公司是實(shí)驗(yàn)試劑一站式采購(gòu)服務(wù)商

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