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reddotbiotech 即用型ELISA試劑盒常見問題

更新時(shí)間：2018-08-08      點(diǎn)擊次數(shù)：5477

 

 

Reddot Biotech Inc.位于加拿大不列顛哥倫比亞省基洛納，由一支在醫(yī)療器械行業(yè)擁有超過35年經(jīng)驗(yàn)的執(zhí)行團(tuán)隊(duì)于2015年成立。我們專注于為市場(chǎng)的客戶提供及時(shí)的客戶服務(wù)，可靠的供應(yīng)和具有性能的產(chǎn)品。我們依靠競(jìng)爭，創(chuàng)新和快速資源分配來滿足客戶需求。

Reddot Biotech Inc.目前專注于銷售用于制藥，實(shí)驗(yàn)室，醫(yī)學(xué)和科研用途的試劑和相關(guān)產(chǎn)品。我們致力于研究和開發(fā)，為客戶提供高質(zhì)量的產(chǎn)品，為任何研究提供準(zhǔn)確，可靠和快速的結(jié)果。憑借與各大洲公司和研究機(jī)構(gòu)合作的豐富經(jīng)驗(yàn)，我們?yōu)槲覀兲峁┑漠a(chǎn)品和服務(wù)提供了巨大的價(jià)值。

Reddotbiotech  常見問題解答

傳統(tǒng)的ELISA試劑盒與即用型ELISA試劑盒

我們新的“即用型”ELISA試劑盒具有以下特點(diǎn)：

  • 縮短實(shí)驗(yàn)時(shí)間 
  • 預(yù)稀釋檢測(cè)試劑
  • 增強(qiáng)穩(wěn)定性，允許在4 o C下儲(chǔ)存整個(gè)試劑盒

這些試劑盒仍然保持我們高水平的質(zhì)量和靈敏度，以及我們12個(gè)月的保質(zhì)期。

與傳統(tǒng)的ELISA試劑盒相比，我們的即用型試劑盒使用起來更容易，更快捷。

提供的試劑和材料

傳統(tǒng)的96T ELISA試劑盒

  • 預(yù)涂，即用型96孔帶鋼板：1
  • 96孔密封板：2
  • 標(biāo)準(zhǔn)：2
  • 標(biāo)準(zhǔn)稀釋液：1 x 20mL
  • 檢測(cè)試劑A：1x120μL（競(jìng)爭試劑盒1x70μL）
  • 檢測(cè)試劑B：1x120μL
  • 分析稀釋劑A：1×12mL
  • 分析稀釋液B：1×12mL
  • TMB底物：1 x 9mL
  • 終止溶液：1 x 6mL
  • 洗滌緩沖液（30倍濃縮液）：1×20mL
  • 使用說明書：1

即用型96T ELISA試劑盒

  • 預(yù)涂，即用型96孔帶鋼板：1
  • 96孔密封板：2
  • 標(biāo)準(zhǔn)：2
  • 標(biāo)準(zhǔn)稀釋液：1 x 20mL
  • 檢測(cè)溶液A：1x12mL
  • 檢測(cè)溶液B：1x12mL
  • TMB底物：1 x 9mL
  • 終止溶液：1 x 6mL
  • 洗滌緩沖液（30倍濃縮液）：1×20mL
  • 使用說明書：1

 

 

傳統(tǒng)的48T ELISA試劑盒

  • 預(yù)涂，即用型96孔帶鋼板：1
  • 96孔密封板：1
  • 標(biāo)準(zhǔn)：1
  • 標(biāo)準(zhǔn)稀釋液：1 x 10mL
  • 檢測(cè)試劑A：1x60μL（競(jìng)爭試劑盒1x35μL）
  • 檢測(cè)試劑B：1x60μL
  • 分析稀釋液A：1×6mL
  • 分析稀釋液B：1×6mL
  • TMB底物：1×4.5mL
  • 終止溶液：1 x 3mL
  • 洗滌緩沖液（30倍濃縮液）：1×10mL
  • 使用說明書：1

 

即用型48T ELISA試劑盒

  • 預(yù)涂，即用型96孔帶鋼板：1
  • 96孔密封板：1
  • 標(biāo)準(zhǔn)：1
  • 標(biāo)準(zhǔn)稀釋液：1 x 10mL
  • 檢測(cè)溶液A：1x6mL
  • 檢測(cè)溶液B：1x6mL
  • TMB底物：1×4.5mL
  • 終止溶液：1 x 3mL
  • 洗滌緩沖液（30倍濃縮液）：1×10mL
  • 使用說明書：1

 

 

 

所需材料但未提供套件

  • 微孔板讀數(shù)器，450±10nm濾光片。
  • 精密單通道或多通道移液器和一次性吸頭。
  • 微量離心管用于稀釋。
  • 去離子水或蒸餾水。
  • 用于印跡微量滴定板的吸水紙。
  • 稀釋洗滌緩沖液的容器。

存放套件

對(duì)于未開封的套件

傳統(tǒng)的ELISA試劑盒：所有試劑應(yīng)根據(jù)樣品瓶上的標(biāo)簽保存。的TMB底物，洗滌緩沖液（30X濃縮物）和終止溶液應(yīng)在被存儲(chǔ)4 ö Ç 在接收而其他人應(yīng)在-20 Ô Ç 。

即用型ELISA試劑盒：所有試劑應(yīng)在收到后于4 o C儲(chǔ)存。

打開套件

打開試劑盒后，仍需要根據(jù)上述儲(chǔ)存條件儲(chǔ)存剩余的試劑。此外，將未使用的孔返回到含有干燥劑包的鋁箔袋中，并沿著拉鏈密封的整個(gè)邊緣重新密封。

注意：

有關(guān)套件的失效日期，請(qǐng)參閱套件盒上的標(biāo)簽。在此日期之前，所有組件都是穩(wěn)定的

強(qiáng)烈建議在開封后1個(gè)月內(nèi)使用剩余的試劑。

樣品采集和存儲(chǔ)

請(qǐng)注意您感興趣的套件推薦哪些樣品類型。

血清

使用血清分離管，讓樣品在室溫下凝固2小時(shí)或在4℃下過夜，然后以約1000×g離心20分鐘。立即測(cè)定新鮮制備的血清，或?qū)悠贩盅b在-20℃或-80℃下備用。避免反復(fù)凍/融循環(huán)。

等離子體

使用EDTA或肝素作為抗凝血?jiǎng)┦占獫{。在收集后30分鐘內(nèi)，在2-8℃下以1000×g離心樣品15分鐘。立即去除血漿并進(jìn)行檢測(cè)，或?qū)悠繁４嬖?20℃或-80℃的等分試樣中以備后用。避免反復(fù)凍/融循環(huán)。

組織勻漿

組織勻漿的制備將根據(jù)組織類型而變化。通常，組織應(yīng)在冰冷的PBS（0.02mol / L，pH 7.0-7.2）中*沖洗以除去過量的血液并在均質(zhì)化前稱重。將組織切成小塊并在冰上用玻璃勻漿器在5-10mL PBS中均化（Micro Tissue Grinders也起作用）。應(yīng)使用超聲波細(xì)胞破碎器對(duì)所得懸浮液進(jìn)行超聲處理，或進(jìn)行兩次凍融循環(huán)以進(jìn)一步破壞細(xì)胞膜。之后，勻漿應(yīng)以5000×g離心5分鐘。立即取出上清液并進(jìn)行分析，或等分試樣并在≤-20℃下儲(chǔ)存。

細(xì)胞裂解物

根據(jù)以下說明，在測(cè)定前必須裂解細(xì)胞：

  • 應(yīng)用胰蛋白酶分離貼壁細(xì)胞，然后通過離心收集（懸浮細(xì)胞可通過直接離心收集）。
  • 在冷PBS中洗滌細(xì)胞三次。
  • 在1X PBS中重懸細(xì)胞并進(jìn)行4次超聲波處理（或在≤-20℃下冷凍細(xì)胞。輕輕混合解凍細(xì)胞。重復(fù)凍融循環(huán)3次。）
  • 在2 - 8℃下以1500×g離心10分鐘以除去細(xì)胞碎片。細(xì)胞培養(yǎng)上清液和其他生物液體 - 以1000×g離心20分鐘。立即去除顆粒物并進(jìn)行分析，或?qū)悠贩盅b在-20℃或-80℃的等分試樣中。避免反復(fù)凍/融循環(huán)。

唾液

使用收集裝置或等同物收集唾液。在2-8在1000×g下離心15分鐘樣品ö C.在≤-20刪除在等分試樣的微粒，并立即檢測(cè)，或?qū)?/span>ö C.避免反復(fù)冷凍/解凍循環(huán)。

尿

無菌收集當(dāng)天的批尿液（中游），直接收集到無菌容器中。離心機(jī)以除去顆粒物質(zhì)，測(cè)定立即或等分試樣并儲(chǔ)存在≤-20 ö C.避免反復(fù)凍融。

牛奶

用于以2 10,000×G下離心15分鐘的樣品- 8 ø C.收集總共3個(gè)周期的水性餾分和離心機(jī)兩次以上。立即測(cè)定或?qū)悠贩盅b在-20 o C或-80 o C以備后用。避免反復(fù)凍/融循環(huán)。

淚液，細(xì)胞培養(yǎng)上清液和其他生物液體

以1000×g離心樣品20分鐘。立即去除顆粒物并進(jìn)行檢測(cè)，或?qū)悠繁４嬖?20 o C或-80 o C的等分試樣中。避免反復(fù)凍/融循環(huán)。

注意：                                                

  • 樣品在5天內(nèi)可以被存儲(chǔ)在4使用Ô C，否則樣品必須儲(chǔ)存在-20 Ô C（≤1月）或-80 Ô C（≤2個(gè)月），以避免生物活性和/或污染的損失。
  • 樣品溶血會(huì)影響結(jié)果; 不會(huì)檢測(cè)到用作樣本的溶血標(biāo)本。
  • 進(jìn)行測(cè)定時(shí)，將樣品置于室溫下。

試劑準(zhǔn)備

*使用前將所有試劑盒組分和樣品置于室溫（18-25 o C）。

標(biāo)準(zhǔn) 

用標(biāo)準(zhǔn)稀釋劑重新配制標(biāo)準(zhǔn)品，在室溫下保持10分鐘，輕輕搖動(dòng)（不要起泡）。有關(guān)儲(chǔ)備溶液中標(biāo)準(zhǔn)濃度的信息，請(qǐng)參閱手冊(cè)。準(zhǔn)備7管含有0.5mL標(biāo)準(zhǔn)稀釋劑的試管，并使用稀釋的標(biāo)準(zhǔn)品生產(chǎn)雙稀釋系列。在下次轉(zhuǎn)移之前*混合每個(gè)管。

檢測(cè)試劑A和檢測(cè)試劑B.

傳統(tǒng)的ELISA試劑盒：使用前短暫旋轉(zhuǎn)或離心檢測(cè)A和檢測(cè)B溶液。分別用Assay Diluent A和B稀釋至工作濃度（1：100）。

即用型ELISA試劑盒：檢測(cè)溶液A和B的濃度已經(jīng)正確，無需進(jìn)一步稀釋。

洗液 

用580mL去離子水或蒸餾水稀釋20mL洗滌液濃縮物（30×），制備600mL洗滌液（1×）。

TMB底物 

用滅菌的吸頭吸取所需劑量的溶液。不要將殘留的溶液倒回到小瓶中。

注意：

  • 不要直接在孔中進(jìn)行連續(xù)稀釋。
  • 在進(jìn)行測(cè)定后15分鐘內(nèi)制備標(biāo)準(zhǔn)品。不要直接在37 o C 溶解試劑。
  • 檢測(cè)試劑A和B是粘性溶液，因此慢慢移液它們以減少體積誤差。
  • 傳統(tǒng)的ELISA試劑盒：根據(jù)說明小心地重新構(gòu)建標(biāo)準(zhǔn)品或使用檢測(cè)試劑A和B，避免起泡并輕輕混合直至晶體*溶解。為了大限度地減少移液造成的不性，請(qǐng)使用小體積并確保移液器已校準(zhǔn)。建議一次移液10μL以上以確保準(zhǔn)確性。                 
  • 即用型ELISA試劑盒：重組標(biāo)準(zhǔn)品只能使用一次。
  • 重構(gòu)的標(biāo)準(zhǔn)品，檢測(cè)試劑A和檢測(cè)試劑B只能使用一次。
  • 如果在洗滌液濃縮物（30×）中形成晶體，則溫?zé)嶂潦覝夭⑤p輕混合直至晶體*溶解。
  • 試劑制備過程中使用的任何污染水或容器都會(huì)影響檢測(cè)結(jié)果。

樣品制備

  • Reddot Biotech僅對(duì)試劑盒本身負(fù)責(zé)，而不是對(duì)試驗(yàn)過程中消耗的樣品負(fù)責(zé)。實(shí)驗(yàn)者應(yīng)該在開始實(shí)驗(yàn)之前總是計(jì)算所需的樣品總量。
  • 實(shí)驗(yàn)者還應(yīng)該在開始之前預(yù)測(cè)大致的濃度。如果預(yù)期值不在標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍內(nèi)，建議確定樣品的宜稀釋度。
  • 如果您使用的樣品類型未在手冊(cè)中指出，則應(yīng)在開始實(shí)際實(shí)驗(yàn)之前進(jìn)行初步實(shí)驗(yàn)以確保試劑盒的有效性。
  • 建議不要使用化學(xué)裂解緩沖液來制備組織或細(xì)胞提取樣品，因?yàn)樗赡軙?huì)由于裂解緩沖液的含量而導(dǎo)致意外的反應(yīng)和結(jié)果。
  • 由于其他來源的抗原與我們?cè)噭┖兄惺褂玫目贵w之間可能存在錯(cuò)配，因此不建議使用其他制造商生產(chǎn)的天然或重組蛋白，因?yàn)槲覀兊脑噭┖锌赡軣o法識(shí)別它們。
  • 我們的試劑盒可能無法檢測(cè)到細(xì)胞培養(yǎng)上清液中的樣品，因?yàn)樗鼈兒苋菀资艿郊?xì)胞活力，細(xì)胞數(shù)量和/或取樣時(shí)間等因素的影響。
  • 建議將未經(jīng)長期儲(chǔ)存的新鮮樣品與我們的試劑盒一起使用。如果樣品長時(shí)間未冷凍保存，可能會(huì)發(fā)生蛋白質(zhì)降解和變性，導(dǎo)致結(jié)果相互矛盾或不正確。

分析程序

用于夾心ELISA試劑盒

  • 確定稀釋標(biāo)準(zhǔn)品，空白樣品和樣品的孔。為標(biāo)準(zhǔn)準(zhǔn)備7口井，為空白準(zhǔn)備1口井。每種稀釋標(biāo)準(zhǔn)品（讀取試劑制備），空白和樣品加入100μL到適當(dāng)?shù)目字?。用Plate密封劑蓋住。在37 o C 孵育2小時(shí)。
  • 從每個(gè)井中取出液體，不要洗。
  • 向每個(gè)孔中加入100μL檢測(cè)試劑A工作溶液（即用型試劑盒中的檢測(cè)溶液A）。用Plate密封劑覆蓋后，在37 o C 孵育1小時(shí)。
  • 吸出溶液，用噴槍，多通道移液器，歧管分配器或自動(dòng)洗衣機(jī)在每個(gè)孔中用350μL1×洗滌液洗滌，靜置1~2分鐘。通過將板輕敲到吸水紙上，*從所有孔中除去剩余的液體。*洗凈3次。后一次洗滌后，通過抽吸或傾析除去任何剩余的洗滌緩沖液。翻轉(zhuǎn)平板并將其吸附在吸水紙上。
  • 向每個(gè)孔中加入100μL檢測(cè)試劑B工作溶液（即用型試劑盒中的檢測(cè)溶液B）。用Plate密封劑覆蓋后，在37 o C 孵育1小時(shí)。
  • 如步驟4中所述，重復(fù)抽吸/洗滌過程總共5次。
  • 每孔加入90μL底物溶液。蓋上新的Plate密封劑。在37 o C 孵育15-25分鐘（不要超過30分鐘）。避光。加入底物溶液后液體會(huì)變藍(lán)。
  • 每孔加入50μL終止液。加入Stop溶液后液體會(huì)變黃。通過敲擊板的側(cè)面來混合液體。如果顏色變化不均勻，請(qǐng)輕輕敲打板以確保充分混合。
  • 去除板底部的任何水滴和指紋，確認(rèn)液體表面沒有氣泡。運(yùn)行酶標(biāo)儀，立即進(jìn)行450nm的測(cè)量。

適用于競(jìng)爭性ELISA試劑盒

  • 確定稀釋標(biāo)準(zhǔn)品，空白樣品和樣品的孔。為標(biāo)準(zhǔn)準(zhǔn)備7口井，為空白準(zhǔn)備1口井。分別加入50μL標(biāo)準(zhǔn)稀釋液（讀取試劑制備），空白和樣品加入適當(dāng)?shù)目字?。然后立即向每個(gè)孔中加入50μL檢測(cè)試劑A（即用型試劑盒中的檢測(cè)溶液A）。輕輕搖動(dòng)平板（建議使用微孔板振蕩器）。用Plate密封劑覆蓋。在37 o C 孵育1小時(shí)。檢測(cè)試劑A可能會(huì)出現(xiàn)混濁。溫?zé)嶂潦覝夭⑤p輕混合直至溶液看起來均勻。
  • 吸出溶液，用噴槍，多通道移液器，歧管分配器或自動(dòng)洗滌器，每孔加入350μL1×洗滌液，靜置1-2分鐘。通過將板輕敲到吸水紙上，*從所有孔中除去剩余的液體。*洗凈3次。后一次洗滌后，通過抽吸或傾析除去任何剩余的洗滌緩沖液。翻轉(zhuǎn)平板并將其吸附在吸水紙上。
  • 向每個(gè)孔中加入100μL檢測(cè)試劑B工作溶液（即用型試劑盒中的檢測(cè)溶液B）。用Plate密封劑覆蓋后，在37 o C 孵育1小時(shí)。
  • 在步驟2中重復(fù)抽吸/洗滌過程總共5次。
  • 每孔加入90μL底物溶液。蓋上新的Plate密封劑。在37 o C 孵育15-25分鐘（不要超過30分鐘）。避光。加入底物溶液后液體會(huì)變藍(lán)。
  • 每孔加入50μL終止液。加入Stop溶液后液體會(huì)變黃。通過敲擊板的側(cè)面來混合液體。如果顏色變化不均勻，請(qǐng)輕輕敲打板以確保充分混合。
  • 去除板底部的任何水滴和指紋，確認(rèn)液體表面沒有氣泡。運(yùn)行酶標(biāo)儀，立即進(jìn)行450nm的測(cè)量。

注意：

  • 分析準(zhǔn)備：為每個(gè)實(shí)驗(yàn)保留適當(dāng)數(shù)量的孔，并從微孔板中移除額外的孔。剩余的井應(yīng)重新密封，并保存在-20 o C的傳統(tǒng)套件中，4 o C的即用型套件。  
  • 樣品或試劑添加：請(qǐng)使用新制備的標(biāo)準(zhǔn)品。小心地將樣品加入孔中并輕輕混合以避免起泡。不要觸摸井壁。對(duì)于該程序中的每個(gè)步驟，將試劑或樣品添加到測(cè)定板的總分配時(shí)間不應(yīng)超過10分鐘。這將確保每個(gè)移液步驟的相等的經(jīng)過時(shí)間，而不會(huì)中斷。建議復(fù)制所有標(biāo)準(zhǔn)品和標(biāo)本，盡管不是必需的。為避免交叉污染，在添加標(biāo)準(zhǔn)品，樣品和試劑之間更換移液器吸頭。此外，對(duì)每種試劑使用分離的儲(chǔ)庫。
  • 孵育：為了確保準(zhǔn)確的結(jié)果，需要在孵育步驟中適當(dāng)粘附板密封劑。在孵化步驟之間不允許孔長時(shí)間未被覆蓋。一旦將試劑添加到孔條中，在測(cè)定期間不要讓條帶干燥。必須控制孵育時(shí)間和溫度。
  • 洗滌：洗滌程序至關(guān)重要。在每個(gè)步驟中*去除液體對(duì)于試劑盒的良好性能是*的。后一次清洗后，通過抽吸或傾析除去任何殘留的清洗液，并去除板底部的任何水滴或指紋。洗滌不足將導(dǎo)致精度差和吸光度讀數(shù)錯(cuò)誤升高。
  • 控制反應(yīng)時(shí)間：觀察加入TMB底物后的顏色變化（例如每10分鐘觀察一次），如果顏色太深，則提前加入終止溶液以避免過強(qiáng)的反應(yīng)，這將導(dǎo)致吸光度讀數(shù)不準(zhǔn)確。
  • TMB底物  很容易被污染。保護(hù)它免受光線和物理污染。 
  • 環(huán)境濕度可能對(duì)從試劑盒獲得的結(jié)果產(chǎn)生影響。如果您工廠的濕度低于60％，建議使用加濕器。

 

測(cè)試原理

用于夾心ELISA試劑盒

該試劑盒中提供的微量滴定板預(yù)先涂有對(duì)靶抗原特異的抗體。然后將標(biāo)準(zhǔn)品或樣品加入適當(dāng)?shù)奈⒘康味ò蹇字?，用?duì)靶抗原特異的生物素綴合的抗體制劑。接下來，將與辣根過氧化物酶（HRP）綴合的抗生物素蛋白加入每個(gè)微孔板孔中并孵育。在添加TMB底物溶液后，僅含有靶抗原，生物素綴合的抗體和酶綴合的抗生物素蛋白的孔將顯示顏色變化。通過添加硫酸溶液終止酶 - 底物反應(yīng)，并且在450nm±10nm的波長下通過分光光度法測(cè)量顏色變化。然后通過比較樣品的OD與標(biāo)準(zhǔn)曲線確定樣品中靶抗原的濃度。

適用于競(jìng)爭性ELISA試劑盒

該測(cè)定采用競(jìng)爭性抑制酶免疫測(cè)定技術(shù)。將靶抗原特異性的單克隆抗體預(yù)先包被在微孔板上。在生物素標(biāo)記的靶抗原和未標(biāo)記的靶抗原（標(biāo)準(zhǔn)品或樣品）之間啟動(dòng)競(jìng)爭性抑制反應(yīng)，其中預(yù)涂的抗體對(duì)靶抗原具有特異性。溫育后，洗去未結(jié)合的綴合物。接下來，將與辣根過氧化物酶（HRP）綴合的抗生物素蛋白加入每個(gè)微孔板孔中并孵育。結(jié)合的HRP綴合物的量是反向正比于樣品中的靶抗原的濃度。加入底物溶液后，顯色的強(qiáng)度與樣品中靶抗原的濃度成比例。

結(jié)果計(jì)算

用于夾心ELISA試劑盒

平均每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品，對(duì)照品和樣品的重復(fù)讀數(shù)，然后減去平均零標(biāo)準(zhǔn)光密度。通過繪制每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品的平均OD和濃度構(gòu)建標(biāo)準(zhǔn)曲線，并通過圖表上的點(diǎn)繪制宜擬合曲線，或在log-log圖紙上創(chuàng)建標(biāo)準(zhǔn)曲線，其中y軸上的目標(biāo)抗原濃度和吸光度x軸。還建議使用繪圖軟件（例如，曲線專家1.30）。如果樣品已稀釋，則從標(biāo)準(zhǔn)曲線讀取的濃度必須乘以稀釋倍數(shù)。

適用于競(jìng)爭性ELISA試劑盒

該測(cè)定采用競(jìng)爭性抑制酶免疫測(cè)定技術(shù)，因此樣品中的靶抗原濃度與測(cè)定信號(hào)強(qiáng)度之間存在負(fù)相關(guān)。平均每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品，對(duì)照品和樣品的重復(fù)讀數(shù)。在對(duì)數(shù) - 對(duì)數(shù)或半對(duì)數(shù)圖紙上創(chuàng)建標(biāo)準(zhǔn)曲線，在y軸上記錄目標(biāo)抗原濃度，在x軸上記錄吸光度。通過標(biāo)準(zhǔn)點(diǎn)繪制宜擬合直線，或者可以通過回歸分析確定。還建議使用繪圖軟件（例如，曲線專家1.30）。如果樣品已稀釋，則從標(biāo)準(zhǔn)曲線讀取的濃度必須乘以稀釋倍數(shù)。

靈敏度

該測(cè)定的靈敏度或檢測(cè)下限（LLD）被定義為可以與零區(qū)分的低蛋白質(zhì)濃度。通過將兩個(gè)標(biāo)準(zhǔn)偏差加到二十個(gè)零標(biāo)準(zhǔn)重復(fù)的平均光密度值并計(jì)算相應(yīng)的濃度來確定。

夾心ELISA試劑盒的典型數(shù)據(jù)

為了使計(jì)算更容易，我們繪制標(biāo)準(zhǔn)的OD值（X軸）與標(biāo)準(zhǔn)的已知濃度（Y軸），盡管濃度是自變量，OD值是因變量。然而，標(biāo)準(zhǔn)曲線的OD值可以根據(jù)測(cè)定性能的條件（例如操作者，移液技術(shù)，洗滌技術(shù)或溫度效應(yīng)）而變化，建議繪制數(shù)據(jù)的對(duì)數(shù)以建立每個(gè)測(cè)試的標(biāo)準(zhǔn)曲線。有關(guān)典型的標(biāo)準(zhǔn)曲線，請(qǐng)參閱套件中包含的手冊(cè)。

確定所有套件精度的一般方法如下所述?？筛鶕?jù)要求提供個(gè)人批量套件的規(guī)格。

  • 測(cè)定內(nèi)精密度（測(cè)定內(nèi)的度）：分別在一個(gè)平板上測(cè)試3個(gè)具有低，中和高水平指數(shù)的樣品20次。
  • 批間精密度（測(cè)定之間的度）：在3個(gè)不同的平板上測(cè)試3個(gè)具有低，中和高水平指數(shù)的樣品，每個(gè)平板8個(gè)重復(fù)。
  • CV（％）= SD /平均值（X）100
    • 分析內(nèi)：CV <10％
    • Inter-Assay：CV <12％

穩(wěn)定性

我們的ELISA試劑盒的穩(wěn)定性取決于活性喪失的速率。在適當(dāng)?shù)膬?chǔ)存條件下，我們的試劑盒的失效率在失效日期內(nèi)通常低于5％。

為盡量減少外部對(duì)我們套件性能的影響，應(yīng)始終控制操作程序和實(shí)驗(yàn)室條件。需要特別注意的因素包括：室溫，空氣濕度和培養(yǎng)箱溫度。還強(qiáng)烈建議整個(gè)測(cè)定由相同的實(shí)驗(yàn)者從開始到結(jié)束進(jìn)行。

分析程序摘要

用于夾心ELISA試劑盒

  • 準(zhǔn)備所有試劑，樣品和標(biāo)準(zhǔn)品;
  • 每孔加入100μL標(biāo)準(zhǔn)品或樣品。在37 o C 孵育2小時(shí);
  • 吸出并加入100μL制備的檢測(cè)試劑A（即用型試劑盒中的檢測(cè)溶液A）。在37 o C 孵育1小時(shí);
  • 吸3次洗凈;
  • 加入100μL制備的檢測(cè)試劑B（即用型試劑盒中的檢測(cè)溶液B）。在37 o C 孵育1小時(shí);
  • 吸取并洗滌5次;
  • 加入90μL底物溶液。在37 o C 孵育15-25分鐘;
  • 加入50μL終止液。立即讀取450nm。

適用于競(jìng)爭性ELISA試劑盒

  • 準(zhǔn)備所有試劑，樣品和標(biāo)準(zhǔn)品;
  • 每孔加入50μL標(biāo)準(zhǔn)品或樣品。然后立即加入50μL制備的檢測(cè)試劑A（即用型試劑盒中的檢測(cè)溶液A）。搖晃和混合。在37oC孵育1小時(shí);
  • 吸3次洗凈;
  • 加入100μL制備的檢測(cè)試劑B（即用型試劑盒中的檢測(cè)溶液B）。在37oC孵育1小時(shí);
  • 吸取并洗滌5次;
  • 加入90μL底物溶液。在37oC孵育15-25分鐘;
  • 加入50μL終止液。立即讀取450nm。

重要的提示

  • 受現(xiàn)有條件和科學(xué)技術(shù)的限制，不可能對(duì)供應(yīng)商提供的原材料進(jìn)行全面的鑒定和分析測(cè)試。因此，可能存在一些定性和/或技術(shù)風(fēng)險(xiǎn)。
  • 終的實(shí)驗(yàn)結(jié)果將與產(chǎn)品的有效性，終用戶的操作技能和實(shí)驗(yàn)環(huán)境密切相關(guān)。請(qǐng)確保有足夠的樣本可以獲得準(zhǔn)確的結(jié)果。
  • 不同批次的試劑盒在檢測(cè)范圍，靈敏度和顯色時(shí)間上可能略有不同。請(qǐng)*按照套件中包含的使用說明書進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。我們的電子版僅供參考。
  • 不要將試劑從一個(gè)試劑盒中混合或替換為另一個(gè)試劑盒。僅使用制造商提供的試劑。
  • 在儲(chǔ)存和孵育期間保護(hù)所有試劑免受強(qiáng)光照射。所有試劑瓶蓋應(yīng)緊密關(guān)閉，以防止液體蒸發(fā)和微生物污染。
  • 當(dāng)次打開板時(shí)，孔中可能存在霧狀物質(zhì)。它對(duì)終的測(cè)定結(jié)果沒有任何影響。在需要之前，不要從儲(chǔ)存袋中取出微量滴定板。
  • 試劑準(zhǔn)備和裝載過程中的程序不正確，以及讀板器的參數(shù)設(shè)置不正確可能導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。在450±10nm波長下帶寬為10nm或更小且光密度范圍為0-3OD或更大的微孔板讀數(shù)器可用于吸光度測(cè)量。請(qǐng)仔細(xì)閱讀說明書并在實(shí)驗(yàn)前調(diào)整儀器。
  • 即使是同一個(gè)實(shí)驗(yàn)者也可能從兩個(gè)獨(dú)立的實(shí)驗(yàn)中獲得不同的結(jié)果。為了獲得更好的可重復(fù)結(jié)果，應(yīng)該控制測(cè)定中每個(gè)步驟的操作。此外，建議在每批次的一般測(cè)定之前進(jìn)行初步實(shí)驗(yàn)。
  • 每個(gè)套件都經(jīng)過了幾次嚴(yán)格的質(zhì)量控制測(cè)試。但是，由于某些意外的運(yùn)輸條件或不同的實(shí)驗(yàn)室設(shè)備，終用戶的結(jié)果可能與我們的內(nèi)部數(shù)據(jù)不一致。不同批次的試劑盒之間的測(cè)定內(nèi)差異也可能來自上述因素。
  • 來自不同制造商的相同產(chǎn)品的套件可能會(huì)產(chǎn)生不同的結(jié)果，因?yàn)槲覀儧]有將我們的產(chǎn)品與其他制造商進(jìn)行比較。
  • 該試劑盒中的標(biāo)準(zhǔn)品以及抗體制備中使用的抗原通常是重組蛋白質(zhì)。不同表達(dá)的序列，表達(dá)系統(tǒng)和/或純化方法可用于制備重組蛋白。在我們的試劑盒中，抗體和抗體對(duì)的篩選技術(shù)也存在差異。因此，我們無法保證我們的試劑盒能夠檢測(cè)其他公司生產(chǎn)的重組蛋白。我們不建議使用Reddot Biotech ELISA試劑盒檢測(cè)其他重組蛋白。
  • 有效期：12個(gè)月。
  • 說明手冊(cè)也適用于48T套件，但48T套件中的所有試劑都減少了一半。

預(yù)防

提供與該試劑盒一起使用的終止溶液是酸溶液。使用此試劑時(shí)，請(qǐng)佩戴眼睛，手，臉和衣物。

 

貨號(hào)

品名

規(guī)格

品牌

RD-ACE2-Ra

Rat Angiotensin I Converting Enzyme 2 (ACE2) ELISA Kit

96T

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RD-ACE2-Ra

Rat Angiotensin I Converting Enzyme 2 (ACE2) ELISA Kit

48T

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RD-ACVAB-Hu

Human Activin AB (ACVAB) ELISA Kit

96T

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RD-ACVAB-Hu

Human Activin AB (ACVAB) ELISA Kit

48T

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RD-ACVA-Hu

Human Activin A (ACVA) ELISA Kit

96T

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RD-ACVA-Hu

Human Activin A (ACVA) ELISA Kit

48T

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RD-ACVA-Mu

Mouse Activin A (ACVA) ELISA Kit

96T

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RD-ACVA-Mu

Mouse Activin A (ACVA) ELISA Kit

48T

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RD-ADIPOR1-Ra

Rat Adiponectin Receptor 1 (ADIPOR1) ELISA Kit

96T

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RD-ADIPOR1-Ra

Rat Adiponectin Receptor 1 (ADIPOR1) ELISA Kit

48T

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RD-ADIPOR2-Hu

Human Adiponectin Receptor 2 (ADIPOR2) ELISA Kit

96T

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RD-ADIPOR2-Hu

Human Adiponectin Receptor 2 (ADIPOR2) ELISA Kit

48T

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RD-ADIPOR2-Ra

Rat Adiponectin Receptor 2 (ADIPOR2) ELISA Kit

96T

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RD-ADIPOR2-Ra

Rat Adiponectin Receptor 2 (ADIPOR2) ELISA Kit

48T

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RD-ADP-b

Bovine Adiponectin (ADP) ELISA Kit

96T

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RD-ADP-b

Bovine Adiponectin (ADP) ELISA Kit

48T

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RD-ADP-c

Canine Adiponectin (ADP) ELISA Kit

96T

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RD-ADP-c

Canine Adiponectin (ADP) ELISA Kit

48T

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RD-ADP-Ch

Chicken Adiponectin (ADP) ELISA Kit

96T

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RD-ADP-Ch

Chicken Adiponectin (ADP) ELISA Kit

48T

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RD-ADP-Hu

Human Adiponectin (ADP) ELISA Kit

96T

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RD-ADP-Hu

Human Adiponectin (ADP) ELISA Kit

48T

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RD-ADP-Mu

Mouse Adiponectin (ADP) ELISA Kit

96T

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RD-ADP-Mu

Mouse Adiponectin (ADP) ELISA Kit

48T

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RD-ADP-p

Porcine Adiponectin (ADP) ELISA Kit

96T

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RD-ADP-p

Porcine Adiponectin (ADP) ELISA Kit

48T

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RD-ADP-Ra

Rat Adiponectin (ADP) ELISA Kit

96T

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RD-ADP-Ra

Rat Adiponectin (ADP) ELISA Kit

48T

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RD-ADP-Rb

Rabbit Adiponectin (ADP) ELISA Kit

96T

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RD-ADP-Rb

Rabbit Adiponectin (ADP) ELISA Kit

48T

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RD-AGT-Hu

Human Angiotensinogen (AGT) ELISA Kit

96T

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RD-AGT-Hu

Human Angiotensinogen (AGT) ELISA Kit

48T

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RD-AGT-Mu

Mouse Angiotensinogen (AGT) ELISA Kit

96T

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RD-AGT-Mu

Mouse Angiotensinogen (AGT) ELISA Kit

48T

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RD-AGTR1-Hu

Human Angiotensin II Receptor 1 (AGTR1) ELISA Kit

96T

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RD-AGTR1-Hu

Human Angiotensin II Receptor 1 (AGTR1) ELISA Kit

48T

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RD-AGTR1-Ra

Rat Angiotensin II Receptor 1 (AGTR1) ELISA Kit

96T

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RD-AGTR1-Ra

Rat Angiotensin II Receptor 1 (AGTR1) ELISA Kit

48T

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RD-AGTR2-Hu

Human Angiotensin II Receptor 2 (AGTR2) ELISA Kit

96T

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RD-AGTR2-Hu

Human Angiotensin II Receptor 2 (AGTR2) ELISA Kit

48T

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RD-AGTR2-Ra

Rat Angiotensin II Receptor 2 (AGTR2) ELISA Kit

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RD-AGTR2-Ra

Rat Angiotensin II Receptor 2 (AGTR2) ELISA Kit

48T

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RD-AGT-Ra

Rat Angiotensinogen (AGT) ELISA Kit

96T

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RD-AGT-Ra

Rat Angiotensinogen (AGT) ELISA Kit

48T

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RD-ALCAM-Hu

Human Activated Leukocyte Cell Adhesion Molecule (ALCAM) ELISA Kit

96T

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RD-ALCAM-Hu

Human Activated Leukocyte Cell Adhesion Molecule (ALCAM) ELISA Kit

48T

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RD-ALCAM-Mu

Mouse Activated Leukocyte Cell Adhesion Molecule (ALCAM) ELISA Kit

96T

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RD-ALCAM-Mu

Mouse Activated Leukocyte Cell Adhesion Molecule (ALCAM) ELISA Kit

48T

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RD-ALCAM-Ra

Rat Activated Leukocyte Cell Adhesion Molecule (ALCAM) ELISA Kit

96T

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RD-ALCAM-Ra

Rat Activated Leukocyte Cell Adhesion Molecule (ALCAM) ELISA Kit

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RD-Ang1-7-c

Canine Angiotensin 1-7 (Ang1-7) ELISA Kit

96T

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RD-Ang1-7-c

Canine Angiotensin 1-7 (Ang1-7) ELISA Kit

48T

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RD-Ang1-7-Hu

Human Angiotensin 1-7 (Ang1-7) ELISA Kit

96T

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RD-Ang1-7-Hu

Human Angiotensin 1-7 (Ang1-7) ELISA Kit

48T

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RD-Ang1-7-Mu

Mouse Angiotensin 1-7 (Ang1-7) ELISA Kit

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RD-Ang1-7-Mu

Mouse Angiotensin 1-7 (Ang1-7) ELISA Kit

48T

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RD-Ang1-7-Ra

Rat Angiotensin 1-7 (Ang1-7) ELISA Kit

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RD-Ang1-7-Ra

Rat Angiotensin 1-7 (Ang1-7) ELISA Kit

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RD-Ang1-9-Hu

Human Angiotensin 1-9 (Ang1-9) ELISA Kit

96T

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RD-Ang1-9-Hu

Human Angiotensin 1-9 (Ang1-9) ELISA Kit

48T

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RD-AngI-c

Canine Angiotensin I (AngI) ELISA Kit

96T

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RD-AngI-c

Canine Angiotensin I (AngI) ELISA Kit

48T

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RD-AngI-Hu

Human Angiotensin I (AngI) ELISA Kit

96T

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RD-AngI-Hu

Human Angiotensin I (AngI) ELISA Kit

48T

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RD-AngII-b

Bovine Angiotensin II (AngII) ELISA Kit

96T

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RD-AngII-b

Bovine Angiotensin II (AngII) ELISA Kit

48T

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RD-AngII-Hu

Human Angiotensin II (AngII) ELISA Kit

96T

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RD-AngII-Hu

Human Angiotensin II (AngII) ELISA Kit

48T

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RD-AngIII-Hu

Human Angiotensin III (AngIII) ELISA Kit

96T

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RD-AngIII-Hu

Human Angiotensin III (AngIII) ELISA Kit

48T

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RD-AngII-Mu

Mouse Angiotensin II (AngII) ELISA Kit

96T

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RD-AngII-Mu

Mouse Angiotensin II (AngII) ELISA Kit

48T

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RD-AngII-Ra

Rat Angiotensin II (AngII) ELISA Kit

96T

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RD-AngII-Ra

Rat Angiotensin II (AngII) ELISA Kit

48T

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RD-AngII-Rb

Rabbit Angiotensin II (AngII) ELISA Kit

96T

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RD-AngII-Rb

Rabbit Angiotensin II (AngII) ELISA Kit

48T

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RD-AngI-Mu

Mouse Angiotensin I (AngI) ELISA Kit

96T

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RD-AngI-Mu

Mouse Angiotensin I (AngI) ELISA Kit

48T

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RD-AngI-Ra

Rat Angiotensin I (AngI) ELISA Kit

96T

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RD-AngI-Ra

Rat Angiotensin I (AngI) ELISA Kit

48T

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RD-ATP4a-Hu

Human ATPase, H+/K+ Exchanging Alpha Polypeptide (ATP4a) ELISA Kit

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RD-ATP4a-Hu

Human ATPase, H+/K+ Exchanging Alpha Polypeptide (ATP4a) ELISA Kit

48T

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RD-ATP4a-Mu

Mouse ATPase, H+/K+ Exchanging Alpha Polypeptide (ATP4a) ELISA Kit

96T

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RD-ATP4a-Mu

Mouse ATPase, H+/K+ Exchanging Alpha Polypeptide (ATP4a) ELISA Kit

48T

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RD-ATP4a-Ra

Rat ATPase, H+/K+ Exchanging Alpha Polypeptide (ATP4a) ELISA Kit

96T

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RD-ATP4a-Ra

Rat ATPase, H+/K+ Exchanging Alpha Polypeptide (ATP4a) ELISA Kit

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RD-Bcl11A-Hu

Human B-Cell CLL/Lymphoma 11A (Bcl11A) ELISA Kit

96T

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RD-Bcl11A-Hu

Human B-Cell CLL/Lymphoma 11A (Bcl11A) ELISA Kit

48T

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RD-Bcl2-b

Bovine B-Cell Leukemia/Lymphoma 2 (Bcl2) ELISA Kit

96T

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RD-Bcl2-b

Bovine B-Cell Leukemia/Lymphoma 2 (Bcl2) ELISA Kit

48T

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RD-Bcl2-Hu

Human B-Cell Leukemia/Lymphoma 2 (Bcl2) ELISA Kit

96T

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RD-Bcl2-Hu

Human B-Cell Leukemia/Lymphoma 2 (Bcl2) ELISA Kit

48T

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RD-Bcl2L2-Ra

Rat B-Cell CLL/Lymphoma 2 Like Protein 2 (Bcl2L2) ELISA Kit

96T

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RD-Bcl2L2-Ra

Rat B-Cell CLL/Lymphoma 2 Like Protein 2 (Bcl2L2) ELISA Kit

48T

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RD-Bcl2L-Mu

Mouse B-Cell CLL/Lymphoma 2 Like Protein (Bcl2L) ELISA Kit

96T

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RD-Bcl2L-Mu

Mouse B-Cell CLL/Lymphoma 2 Like Protein (Bcl2L) ELISA Kit

48T

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RD-Bcl2-Mu

Mouse B-Cell Leukemia/Lymphoma 2 (Bcl2) ELISA Kit

96T

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RD-Bcl2-Mu

Mouse B-Cell Leukemia/Lymphoma 2 (Bcl2) ELISA Kit

48T

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RD-Bcl2-Ra

Rat B-Cell Leukemia/Lymphoma 2 (Bcl2) ELISA Kit

96T

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RD-Bcl2-Ra

Rat B-Cell Leukemia/Lymphoma 2 (Bcl2) ELISA Kit

48T

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RD-Bcl9-Mu

Mouse B-Cell CLL/Lymphoma 9 (Bcl9) ELISA Kit

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RD-Bcl9-Mu

Mouse B-Cell CLL/Lymphoma 9 (Bcl9) ELISA Kit

48T

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RD-BDNF-c

Canine Brain Derived Neurotrophic Factor (BDNF) ELISA Kit

96T

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RD-BDNF-c

Canine Brain Derived Neurotrophic Factor (BDNF) ELISA Kit

48T

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RD-BDNF-Ch

Chicken Brain Derived Neurotrophic Factor (BDNF) ELISA Kit

96T

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RD-BDNF-Ch

Chicken Brain Derived Neurotrophic Factor (BDNF) ELISA Kit

48T

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RD-BDNF-Gu

Guinea pig Brain Derived Neurotrophic Factor (BDNF) ELISA Kit

96T

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RD-BDNF-Gu

Guinea pig Brain Derived Neurotrophic Factor (BDNF) ELISA Kit

48T

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RD-BDNF-Hu

Human Brain Derived Neurotrophic Factor (BDNF) ELISA Kit

96T

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RD-BDNF-Hu

Human Brain Derived Neurotrophic Factor (BDNF) ELISA Kit

48T

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RD-BDNF-Mu

Mouse Brain Derived Neurotrophic Factor (BDNF) ELISA Kit

96T

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RD-BDNF-Mu

Mouse Brain Derived Neurotrophic Factor (BDNF) ELISA Kit

48T

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RD-BDNF-p

Porcine Brain Derived Neurotrophic Factor (BDNF) ELISA Kit

96T

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RD-BDNF-p

Porcine Brain Derived Neurotrophic Factor (BDNF) ELISA Kit

48T

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RD-BDNF-Ra

Rat Brain Derived Neurotrophic Factor (BDNF) ELISA Kit

96T

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RD-BDNF-Ra

Rat Brain Derived Neurotrophic Factor (BDNF) ELISA Kit

48T

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RD-BDNF-Rb

Rabbit Brain Derived Neurotrophic Factor (BDNF) ELISA Kit

96T

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RD-BDNF-Rb

Rabbit Brain Derived Neurotrophic Factor (BDNF) ELISA Kit

48T

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RD-BLC1-Hu

Human B-Lymphocyte Chemoattractant 1 (BLC1) ELISA Kit

96T

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RD-BLC1-Hu

Human B-Lymphocyte Chemoattractant 1 (BLC1) ELISA Kit

48T

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RD-BLC1-Mu

Mouse B-Lymphocyte Chemoattractant 1 (BLC1) ELISA Kit

96T

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RD-BLC1-Mu

Mouse B-Lymphocyte Chemoattractant 1 (BLC1) ELISA Kit

48T

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RD-BLC1-Ra

Rat B-Lymphocyte Chemoattractant 1 (BLC1) ELISA Kit

96T

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RD-BLC1-Ra

Rat B-Lymphocyte Chemoattractant 1 (BLC1) ELISA Kit

48T

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RD-BLK-Hu

Human B-Lymphoid Tyrosine Kinase (BLK) ELISA Kit

96T

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RD-BLK-Hu

Human B-Lymphoid Tyrosine Kinase (BLK) ELISA Kit

48T

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RD-BMP2-b

Bovine Bone Morphogenetic Protein 2 (BMP2) ELISA Kit

96T

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RD-BMP2-b

Bovine Bone Morphogenetic Protein 2 (BMP2) ELISA Kit

48T

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RD-BMP2-Ch

Chicken Bone Morphogenetic Protein 2 (BMP2) ELISA Kit

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RD-BMP2-Ch

Chicken Bone Morphogenetic Protein 2 (BMP2) ELISA Kit

48T

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RD-BMP2-Hu

Human Bone Morphogenetic Protein 2 (BMP2) ELISA Kit

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RD-BMP2-Hu

Human Bone Morphogenetic Protein 2 (BMP2) ELISA Kit

48T

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RD-BMP2-Mu

Mouse Bone Morphogenetic Protein 2 (BMP2) ELISA Kit

96T

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RD-BMP2-Mu

Mouse Bone Morphogenetic Protein 2 (BMP2) ELISA Kit

48T

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RD-BMP2-p

Porcine Bone Morphogenetic Protein 2 (BMP2) ELISA Kit

96T

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RD-BMP2-p

Porcine Bone Morphogenetic Protein 2 (BMP2) ELISA Kit

48T

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RD-BMP2-Ra

Rat Bone Morphogenetic Protein 2 (BMP2) ELISA Kit

96T

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RD-BMP2-Ra

Rat Bone Morphogenetic Protein 2 (BMP2) ELISA Kit

48T

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RD-BMP2-Rb

Rabbit Bone Morphogenetic Protein 2 (BMP2) ELISA Kit

96T

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RD-BMP2-Rb

Rabbit Bone Morphogenetic Protein 2 (BMP2) ELISA Kit

48T

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RD-BMP4-b

Bovine Bone Morphogenetic Protein 4 (BMP4) ELISA Kit

96T

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RD-BMP4-b

Bovine Bone Morphogenetic Protein 4 (BMP4) ELISA Kit

48T

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RD-BMP4-c

Canine Bone Morphogenetic Protein 4 (BMP4) ELISA Kit

96T

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RD-BMP4-c

Canine Bone Morphogenetic Protein 4 (BMP4) ELISA Kit

48T

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RD-BMP4-Ch

Chicken Bone Morphogenetic Protein 4 (BMP4) ELISA Kit

96T

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RD-BMP4-Ch

Chicken Bone Morphogenetic Protein 4 (BMP4) ELISA Kit

48T

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RD-BMP4-g

Goat Bone Morphogenetic Protein 4 (BMP4) ELISA Kit

96T

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RD-BMP4-g

Goat Bone Morphogenetic Protein 4 (BMP4) ELISA Kit

48T

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Porcine Bone Morphogenetic Protein 4 (BMP4) ELISA Kit

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Rat Bone Morphogenetic Protein 4 (BMP4) ELISA Kit

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Rabbit Bone Morphogenetic Protein 4 (BMP4) ELISA Kit

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Porcine Endothelin 1 (EDN1) ELISA Kit

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Porcine Endothelin 1 (EDN1) ELISA Kit

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Rat Endothelin 1 (EDN1) ELISA Kit

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Rat Endothelin 1 (EDN1) ELISA Kit

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Human Fibroblast Growth Factor 11 (FGF11) ELISA Kit

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Mouse Fibroblast Growth Factor 11 (FGF11) ELISA Kit

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Mouse Fibroblast Growth Factor 11 (FGF11) ELISA Kit

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Rat Fibroblast Growth Factor 11 (FGF11) ELISA Kit

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