Item#:
cAP-0010
Size | Price |
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1.0 Frozen Vial | $600.00 |
訂單信息 | |
產(chǎn)品名稱 | 人視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細胞(HRMVEC) |
目錄號 | cAP-0010 |
產(chǎn)品格式 | 冷凍瓶 |
細胞數(shù)量 | > 5x10 [5]個細胞/小瓶 |
一般信息HRMVEC(cAP-0010)細胞是從正常人視網(wǎng)膜組織中分離出來的。將細胞裝在冷凍小瓶中(第3代提供細胞)。推薦使用內(nèi)皮細胞生長培養(yǎng)基(EGM,包含10%的血清和生長補充劑,cAP-02)進行細胞培養(yǎng),按照以下詳細方案進行培養(yǎng)時,這些細胞的小平均群體倍增水平> 20。 | |
細胞的表征 | |
1. | 細胞質(zhì)VWF /因子VIII免疫熒光陽性> 95% |
2. | 免疫熒光檢測Di-I-Ac-LDL細胞質(zhì)攝取> 95%陽性 |
3. | 細胞質(zhì)PECAM1免疫熒光陽性> 95% |
4. | HRMVEC對HIV-1,HBV,HCV和支原體呈陰性 |
產(chǎn)品使用情況單元僅供研究使用。 | |
用干冰包裝運輸冷凍瓶。 | |
到達細胞的處理當您收到裝有冷凍小瓶中的細胞的干冰包裝時,請將冷凍小瓶中的細胞轉(zhuǎn)移到-80C冷凍室中進行短期保存,或者將其移入液氮罐中進行長期保存。 | |
解凍細胞和亞培養(yǎng)的協(xié)議 | |
a) | T25燒瓶的預涂-將2ml快速涂層溶液(cAP-01)加入T25燒瓶中,以覆蓋燒瓶的整個表面,5分鐘后,通過抽吸處理過量的涂層溶液,準備使用燒瓶(盡管可以使用包含其他細胞外基質(zhì)(即明膠,膠原蛋白和纖連蛋白)的溶液,但請確保事先優(yōu)化條件)。 |
B) | 首先在37°C水浴中解凍冷凍的細胞瓶,然后將細胞轉(zhuǎn)移到裝有10ml cAP-02培養(yǎng)基的預涂T25燒瓶中,細胞通常會匯合過夜,并準備進行傳代。 |
C) | 要傳代細胞,請在T25燒瓶中用5ml HBSS(RT)沖洗兩次。然后將2ml胰蛋白酶/ EDTA(RT)(cAP-23)加入一個T25燒瓶中;吸出后在20秒內(nèi)輕輕處置過量的胰蛋白酶/ EDTA溶液。 |
D) | 將T25燒瓶中的細胞在室溫或37°C下放置1分鐘(大多數(shù)細胞通常會在1-2分鐘內(nèi)從表面分離;或在顯微鏡下監(jiān)控細胞,直到大多數(shù)細胞被聚集起來,然后輕輕敲擊燒瓶)靠在工作臺表面上,在顯微鏡下監(jiān)控時,細胞會在燒瓶表面上移動。 |
E) | 加入5ml胰蛋白酶中和緩沖液,并通過800g離心5分鐘使細胞旋轉(zhuǎn)。 |
G) | 用10或15ml cAP-2培養(yǎng)基重懸細胞沉淀,然后將5 ml分別轉(zhuǎn)移到2或3個預涂的T25燒瓶中(對于1/2至1/3的繼代培養(yǎng)比例)。 |
H) | 每2或3天更換培養(yǎng)基,通常在7天內(nèi)(當以1/3的比例分裂時)融合細胞。 |
I) | 要準備靜態(tài)細胞,當細胞幾乎匯合時,請在實驗前約8-12小時用含有0.5%FBS的內(nèi)皮基礎(chǔ)培養(yǎng)基(EBM,cAP-03)代替cAP-02。 |
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