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EUROIMMUN微孔板ELISA

更新時(shí)間:2019-12-10      點(diǎn)擊次數(shù):1251

 

EUROIMMUN microplate ELISA

EUROIMMUN微孔板ELISA

測試原理

  • 涂有純化,生化特性已鑒定的抗原的聚苯乙烯微孔板條用作包含結(jié)合抗原的固相。
  • 如果樣品呈陽性,則稀釋的血清樣品中的特異性抗體會(huì)附著在與固相偶聯(lián)的抗原上。
  • 第二步,用過氧化物酶標(biāo)記的抗人抗體檢測附著的抗體。
  • 第三步,使用能夠促進(jìn)顯色反應(yīng)的色原/底物溶液使結(jié)合的抗體可見。產(chǎn)生的顏色強(qiáng)度與血清樣品中抗體的濃度成正比。
  • 單特異性ELISA(具有單個(gè)抗原的酶免疫測定)為檢測抗體提供了定量的體外測定。“ Profile ELISA”提供了一種半定量體外測定法,用于檢測單個(gè)微孔板條上的不同抗體。
  • “ Pool ELISA”的固相涂有抗原混合物,用于半定量檢測抗體,其特異性必須隨后通過單特異性測定進(jìn)行研究。

可靠,經(jīng)濟(jì)的校準(zhǔn)/評(píng)估

  • 在定量ELISA的情況下,通常使用三個(gè)校準(zhǔn)血清進(jìn)行校準(zhǔn)。

-校準(zhǔn)血清1:測量范圍的上限
-校準(zhǔn)血清2:正常范圍的上限(臨界值)
-校準(zhǔn)血清3:陰性

  • 無需孵育空白值或重復(fù)測定。
  • 僅使用一個(gè)校準(zhǔn)器即可進(jìn)行半定量ELISA。在某些ELISA中可找到擴(kuò)展的校準(zhǔn)曲線,用于免疫測定或CSF診斷。
  • 以相對(duì)單位(RU / ml)進(jìn)行校準(zhǔn),如果存在參考血清,則以單位(IU / ml)進(jìn)行校準(zhǔn)。
  • 可以選擇使用測試套件中包含的陽性或陰性對(duì)照血清來執(zhí)行每個(gè)測試。提供了每種校準(zhǔn)物和對(duì)照血清的試劑盒特定參考范圍。
  • 使用常規(guī)ELISA軟件可以輕松執(zhí)行所有校準(zhǔn)方法。

 

簡單,快速,經(jīng)濟(jì)的處理

  • 含有斷裂孔的微孔板條(Profile ELISA除外)。
  • 為避免混淆,微孔板條或試劑孔上印有抗原縮寫。
  • 準(zhǔn)備使用的試劑(洗滌緩沖液:濃縮液)。
  • 顏色編碼可以清楚地識(shí)別試劑。

暗紅色:校準(zhǔn)血清1 
紅色:校準(zhǔn)血清2 
淡紅色:校準(zhǔn)血清3 
深藍(lán)色:陽性對(duì)照血清
綠色:陰性對(duì)照血清
-樣品緩沖液和抗人Ig POD綴合物:不同的顏色

  • 傳染性血清學(xué)ELISA(檢測IgM類抗體)的樣品緩沖液已經(jīng)包含IgG / RF吸收劑。
  • 與所有商用洗衣機(jī)和閱讀器系統(tǒng)兼容。

 

低抗體抗體的測定

  • 通過研究抗體的親和力已經(jīng)建立了新鮮感染的血清學(xué)診斷的替代原理。
  • 感染后免疫系統(tǒng)的一個(gè)反應(yīng)是低抗體的形成。隨著感染的進(jìn)行,越來越多的抗原適應(yīng)性IgG形成,并且親和力增加。只要尚未在血清中檢測到高親和力的IgG,就可以認(rèn)為感染仍處于早期階段。
  • 為了鑒定患者血清中的低抗體抗體,平行進(jìn)行了兩次酶標(biāo)板ELISA:一項(xiàng)以常規(guī)方式進(jìn)行測試,另一項(xiàng)包括在患者血清與過氧化物酶標(biāo)記的抗人IgG孵育之間進(jìn)行尿素處理,結(jié)果低抗原性抗體與抗原的分離。
  • 如果通過尿素處理顯著降低ELISA的滅絕率,則存在低抗體抗體。為了客觀地解釋,可以在有和沒有尿素孵育的情況下,從測量值中計(jì)算出相對(duì)親和力指數(shù)(RAI)。
  • 血清稀釋度1:100,共軛類抗人IgG,POD標(biāo)記。
  • 3點(diǎn)校準(zhǔn),定量(IgG)。
  • 可以使用以下檢測試劑盒來確定親和力:弓形蟲,CMV,麻疹病毒,風(fēng)疹病毒,VZV,TBE病毒,EBV-CA。

腦脊液中的抗體測定

  • 適應(yīng)癥:大腦局部感染。
  • CSF稀釋度1:2,血清稀釋度1:404。綴合類別抗人IgG或IgM,POD標(biāo)記。
  • 易于操作:即用型試劑。
  • 4點(diǎn)校準(zhǔn),定量。相同的孵育條件和時(shí)間(室溫; 60分鐘/ 60分鐘/ 15分鐘):用于CSF診斷的所有EUROIMMUN ELISA可以毫無困難地組合在一塊相同的微孔板上。
  • 在一塊相同的微孔板上平行于CSF中的抗體濃度確定患者血清中的抗體濃度。CSF /血清商CSQ 路徑。從兩個(gè)測量值計(jì)算得出。
  • 如果特異性抗體CSQ 路徑的CSF /血清商數(shù)存在,則存在鞘內(nèi)特異性抗體的合成。顯著高于整個(gè)IgG的CSF /血清商(CSQ total)或CSQ lim(如有必要)。。這兩個(gè)值的關(guān)系表示相對(duì)CSF /血清商CSQ rel。(同義詞:抗體特異性指數(shù),ASI)。
  • 結(jié)果解釋(根據(jù)Reiber教授的建議):
  • CSQ rel。<0.6:結(jié)果不可靠,請(qǐng)檢查
    CSQ rel是否存在錯(cuò)誤。0.6-1.3:標(biāo)準(zhǔn)范圍
  • CSQ rel。1.3-1.5:邊界范圍
    CSQ 相對(duì)。> 1.5:指示中樞神經(jīng)系統(tǒng)中病原體特異性抗體的產(chǎn)生
  • 用于CSQ rel的自動(dòng)計(jì)算。EUROIMMUN免費(fèi)提供特定的Excel表。
  • 高的靈敏度,特異性和可重復(fù)性。血清和腦脊液中的抗體濃度可以在整個(gè)線性測量范圍內(nèi)確定。
  • 提供以下用于CSF診斷的測試試劑盒:伯氏疏螺旋體,弓形蟲,HSV-1,HSV-2,HSV-1 / 2池,CMV,風(fēng)疹病毒,麻疹病毒,腮腺炎病毒,VZV,TBE,EBV-CA。
  • 所有用于CSF診斷的測試系統(tǒng)也只能用于血清學(xué)。
  • *適合于孵化設(shè)備中的自動(dòng)孵化。
  •  

 

孵化

微孔板ELISA孵育

移液器:
每孔100 µl

孵育:
30分鐘

洗滌:每孔
300 µl洗滌緩沖液
 

3倍

移液器:
每孔100 µl

孵育:
30分鐘

洗滌:每孔
300 µl洗滌緩沖液
 

3倍

移液器:
每孔100 µl

孵育:
15分鐘

移液器:
每孔100 µl

評(píng)估:

波長為450 nm的光度測量

另請(qǐng)參閱自動(dòng)化選項(xiàng)。

執(zhí)行測試時(shí),將使用當(dāng)前有效的測試指令。

 

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