ABP Biosciences向從事生命科學(xué)研究,診斷研發(fā)和藥物發(fā)現(xiàn)的科學(xué)家發(fā)明,開發(fā)和銷售創(chuàng)新產(chǎn)品和技術(shù)。我們專注于熒光標(biāo)記和檢測技術(shù)領(lǐng)域。我們的產(chǎn)品使科學(xué)家和生物醫(yī)學(xué)研究人員能夠更好地了解分子生物學(xué),細(xì)胞生物學(xué)和免疫學(xué)。我們致力于提供各種高質(zhì)量,高價位的產(chǎn)品。
abpbio核酸凝膠污漬說明書
Nucleic Acid Gel Stains
ABP Biosciences提供用于凝膠前和后染色的核酸凝膠染料GreenView™,GreenView™Plus,GreenView™Ultra和RedView™,以及用于在電泳前與核酸混合的SafeGreen™和SafeRed™加載染料。這些染料是下一代熒光核酸凝膠染料,旨在替代高度誘變的溴化乙錠(EB)。這些染料具有高靈敏度,低毒性和出色的穩(wěn)定性,優(yōu)于EB。
EB由于其低成本和通常足夠的敏感性而被廣泛用于核酸凝膠染色。但是,EB具有高度致突變性。與去污和廢物處理有關(guān)的安全隱患和成本終可能使染料昂貴且使用不便。
圖1。GreenView™,GreenView™Plus和GreenView™Ultra(左)的凝膠染色結(jié)果,以及SYBR Safe™和GelGreen™(右)的比較結(jié)果。左:將1 kb DNA階梯的兩倍連續(xù)稀釋液(NEB,目錄號N0468S)以3泳道分別以25 ng,50 ng和100 ng(左至右)的量上樣到每個凝膠上,然后進(jìn)行后染色GreenView™,GreenView™Plus和GreenView™Ultra。右圖:結(jié)果表明GreenView™具有與SYBR Safe™和GelGreen™類似的靈敏度,GreenView™Plus和GreenView™Ultra具有更好的靈敏度。
圖2。RedView™和GelRed™會導(dǎo)致凝膠染色。將1 kb DNA階梯的兩倍連續(xù)稀釋液(NEB,Cat#N0468S)在3條泳道中分別以25 ng,50 ng和100 ng(從左到右)的量上樣到每個凝膠上,然后用RedView進(jìn)行后染色™和GelRed™。結(jié)果表明,RedView™與GelRed™具有相似的靈敏度。
除了比EB更安全之外,與SYBR Safe DNA凝膠染料相比,GreenView™,GreenView™Plus和RedView™還顯示出降低的細(xì)胞通透性,使其更加安全(圖3)。
圖3。使用SYBR Safe,GreenView,GreenView Plus和RedView進(jìn)行細(xì)胞通透性測試。將Hela細(xì)胞與1X SYBR Safe,GreenView,GreenView Plus和RedView在37℃孵育30分鐘。GreenView Plus和RedView不能穿透細(xì)胞膜以結(jié)合活細(xì)胞中的DNA,并且比SYBR Safe安全得多,后者可以迅速進(jìn)入細(xì)胞并染色核。
ABP Biosciences提供了下一代熒光核酸凝膠染料SafeGreen™和SafeRed™,它們具有非凡的結(jié)合親和力,可確保染料/ DNA締合在電泳過程中保持穩(wěn)定。因此,可以在電泳前用SafeGreen™或SafeRed™對樣品進(jìn)行染色,從而減少了處理大量EB所固有的危害。
SafeGreen™和SafeRed™是在6X DNA上樣緩沖液中特別配制的,該緩沖液包含兩種常用的跟蹤染料:二甲苯氰基FF和溴酚藍(lán),用于在凝膠運(yùn)行時對其進(jìn)行監(jiān)測。凝膠可以在LED或UV燈下直接可視化,而無需任何額外的染色步驟(圖4)。
圖4。將SafeGreen™和SafeRed™與DNA階梯預(yù)混后可進(jìn)行凝膠染色。將1 kb DNA Ladder(Cat#D001)與SafeGreen™或SafeRed™以5:1的比例混合,然后加載到每個孔中。凝膠直接在紫外線透射儀上成像。
SafeGreen™和SafeRed™專門設(shè)計為不滲透細(xì)胞膜,從而通過防止染料進(jìn)入活細(xì)胞來降低遺傳毒性(圖5)。
圖5。使用SYBR Safe™,SafeGreen™和SafeRed™進(jìn)行細(xì)胞通透性測試。將Hela細(xì)胞與1X SYBR Safe™,SafeGreen™和SafeRed™在37℃孵育30分鐘。SafeGreen™和SafeRed™不能穿透細(xì)胞膜與活細(xì)胞中的DNA結(jié)合,并且比SYBR Safe™安全得多,后者迅速進(jìn)入細(xì)胞并染了細(xì)胞核。
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