eaglebio KTR-757說(shuō)明書

MMAE ADC ELISA Kit

SKU：KTR-757

分類：所有產(chǎn)品，檢測(cè)試劑盒，癌癥生物標(biāo)記試劑盒，藥物監(jiān)測(cè)檢測(cè)試劑盒，免疫學(xué)檢測(cè)試劑盒

MMAE抗體藥物偶聯(lián)物（ADC）ELISA分析試劑盒（酶聯(lián)免疫分析試劑盒）旨在用于定量測(cè)定測(cè)試樣品中抗體-MMAE-偶聯(lián)物的水平。對(duì)于MMAE抗體藥物偶聯(lián)物（ADC）的臨床前和臨床藥理學(xué)研究非常有用。該試劑盒可直接使用來(lái)自組織/細(xì)胞培養(yǎng)物的樣品以及來(lái)自人，大鼠，小鼠，靈長(zhǎng)類動(dòng)物等的血清樣品。可以使用該試劑盒測(cè)量基于人源化單克隆抗體的MMAE-ADC和基于小鼠單克隆抗體的MMAE-ADC。

MMAE ADC ELISA試劑盒

在美國(guó)開(kāi)發(fā)和生產(chǎn)的MMAE ADC ELISA試劑盒

尺寸：1×96個(gè)孔的
靈敏度：0.0435μg/ mL的
動(dòng)態(tài)范圍：0.032 - 4.0微克/毫升
孵育時(shí)間：2.5小時(shí)
樣品類型：血清，細(xì)胞培養(yǎng)，組織
樣本大小：100μL
備用名稱：?jiǎn)渭谆鵤uristatin E，MMAE抗體藥物共軛ELISA試劑盒
僅供研究使用

包含的控件

測(cè)定原理

MMAE ADC ELISA試劑盒的設(shè)計(jì)，開(kāi)發(fā)和生產(chǎn)，用于定量測(cè)量血清中的單甲基澳瑞他汀E（MMAE）共軛物。該測(cè)定法利用競(jìng)爭(zhēng)性免疫測(cè)定技術(shù)和僅與單甲基澳瑞他汀E結(jié)合的抗體結(jié)合使用。

將測(cè)定校準(zhǔn)物（抗體MMAE綴合物）和測(cè)試血清樣品直接添加到微滴定板的孔中，該板已涂有特異性抗MMAE抗體。隨后，將辣根過(guò)氧化物酶（HRP）共軛的MMAE添加到每個(gè)孔中。在溫育期間，抗體MMAE綴合物與HRP綴合的MMAE競(jìng)爭(zhēng)抗MMAE抗體的有限結(jié)合位點(diǎn)。形成了包被良好的“抗MMAE抗體-HRP綴合的MMAE”的免疫復(fù)合物。未結(jié)合的抗體和緩沖液基質(zhì)在隨后的洗滌步驟中被去除。為了檢測(cè)該免疫復(fù)合物，將孔與底物溶液在定時(shí)反應(yīng)中孵育，然后將其與酸性試劑（即ELISA終止溶液）終止反應(yīng)。然后在分光光度計(jì)酶標(biāo)儀中測(cè)量吸光度。結(jié)合到每個(gè)微量滴定孔壁上的免疫復(fù)合物的酶促活性與測(cè)試樣品中抗體-MMAE偶聯(lián)物的量成反比。通過(guò)在4參數(shù)或log-logit曲線擬合上繪制每個(gè)校準(zhǔn)器的吸光度與各自的抗體-MMAE綴合物濃度的關(guān)系來(lái)生成校準(zhǔn)曲線。直接從該校準(zhǔn)曲線確定測(cè)試樣品中抗體-MMAE綴合物的濃度。

測(cè)定步驟

1. 將足夠數(shù)量的Anti-MMAE抗體包被的微孔板/孔放在支架中，以一式兩份運(yùn)行人類Anti-MMAE標(biāo)準(zhǔn)品，對(duì)照和未知樣品。
2. 將100 µL校準(zhǔn)物和測(cè)試樣品添加到微孔中。
3. 牢固密封板孔，蓋上箔紙或其他材料以防光照，然后在ELISA板振動(dòng)器（小軌道半徑）上以400至450 rpm的轉(zhuǎn)速旋轉(zhuǎn)30分鐘。
4. 立即向每個(gè)孔中加入25 µL HRP共軛MMAE（目錄號(hào)30719）。（注意：添加HRP共軛MMAE之前無(wú)洗滌步驟）
5. 牢固密封板孔，用箔紙或其他材料遮蓋以防光照，然后在ELISA板振蕩器（小軌道半徑）上旋轉(zhuǎn)2個(gè)小時(shí)。在400至450 rpm下±10分鐘。
6. 通過(guò)將350 µL工作洗滌溶液分配到每個(gè)孔中，然后將所有內(nèi)容物*吸出，將每個(gè)孔洗滌5次。
7. 或者，可以使用自動(dòng)微孔板清洗機(jī)。
8. 在每個(gè)孔中加入100 µL ELISA HRP底物。
9. 用鋁箔或其他材料覆蓋板，以避免暴露在光線下。在室溫下靜置板靜置20分鐘。
10. 立即將100 µL ELISA終止溶液添加到每個(gè)孔中。輕輕混合。
11. 讀取450 nm處的吸光度。

典型標(biāo)準(zhǔn)曲線

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