immaginabiotech AHA003_6
平行分離和下游分析翻譯的 RNA(通過 RNA-seq 或 qPCR)和新合成的蛋白質(zhì)。
三個(gè)兼容模塊包括用于 RNA 分析的模塊 1、用于蛋白質(zhì)組分析的模塊 2 和用于蛋白質(zhì)印跡制備的模塊 3。
immaginabiotech AHA003_6應(yīng)用:
-翻譯組分析
- 從頭蛋白質(zhì)組分析
-蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)錄組學(xué)
請注意,AHARIBO 將在 +4°C 時(shí)分裝在兩個(gè)單獨(dú)的盒子中運(yùn)輸。
常見問題解答:
我可以在動物模型中使用AHARIBO嗎?
不,AHARIBO致力于細(xì)胞培養(yǎng)。AHA與新生肽的結(jié)合對該方案至關(guān)重要。盡管原則上可以在活體動物中加入AHA(Sarah Calve et al.Sci Rep.2016;6:32377)在這個(gè)階段,我們不建議在動物或活生物體中研究AHARIBO。
我不小心把珠子凍住了,我還能用嗎?
對通常,不建議凍結(jié)珠子,但不應(yīng)影響珠子的特性。
在繼續(xù)溶解之前,我需要用sBlock處理細(xì)胞嗎?
是的,必須將sBlock添加到細(xì)胞中,以阻止翻譯,并將新生肽固定在核糖體上,這是AHARIBO的關(guān)鍵步驟。sBlock也存在于試劑盒中的裂解緩沖液(LB)和W緩沖液(WB)中。如果錯(cuò)誤地跳過細(xì)胞與sBlock的孵育,裂解緩沖液中的sBlock將穩(wěn)定核糖體上的新生肽。
我應(yīng)該如何儲存用于AHARIBO實(shí)驗(yàn)的裂解物?
我們建議在80°C至80°C的溫度下儲存,最多1個(gè)月。
我沒有足夠的時(shí)間在一天內(nèi)完成所有步驟。我可以存儲功能化珠子(在步驟1之后)并稍后繼續(xù)嗎?
是的,你可以在第一步停下來。我們建議將珠子保持在+4°C過夜。不要冷凍珠子。
可以使用什么樣的輸入材料?
我們建議從對應(yīng)于0.2 a.u.(260 nm)的總體積的裂解液開始。另一方面,我們測試了AHARIBO RNA,HeLa裂解物吸光度降至0.002 a.u.我如何計(jì)算吸光度?
您只需在260 nm處以溶解緩沖液為空白測量納米滴處的溶解液,并使用該吸光度值計(jì)算所需的體積。一個(gè)實(shí)際的例子是,如果你的裂解液的吸光度(A260)對應(yīng)于10,這意味著你有10個(gè)A.u./mL,然后對應(yīng)于0.01 A.u./µL。因此,如果你想從0.2 A.u開始,需要20µL的裂解液。
在AHARIBO試劑盒中處理之前,有沒有辦法改進(jìn)我的樣品?
可以使用標(biāo)準(zhǔn)方案清潔樣品,以減少細(xì)胞裂解物。這將去除全長合成蛋白質(zhì),豐富含有新生鏈的核糖體部分。
我可以為哪一種物種使用AHARIBO?
一般來說,AHARIBO在真核核糖體上效果良好,但到今天為止,它已在哺乳動物細(xì)胞和小鼠體內(nèi)得到驗(yàn)證。sBlock是真核生物*的翻譯抑制,不適用于原核生物。
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