absoluteantibody Anti-Z-DNA說明書
描述:抗Z-DNA的重組單克隆抗體。使用來自雜交瘤Z22的具有可變區(qū)域(即特異性)的AbAb重組平臺(tái)制造。
克隆名稱:
Z22型
已發(fā)布的應(yīng)用程序:
凝膠阻滯試驗(yàn)、SPR、ELISA、IF
已發(fā)表物種反應(yīng)性:
物種獨(dú)立
產(chǎn)品代碼:Ab00783-3.0
抗Z-DNA[Z22],小鼠IgG2b,Kappa
純化抗體。
純化:蛋白A親和純化
供應(yīng)單位:PBS,含0.02%Proclin 300。
存儲(chǔ)建議:存儲(chǔ)在4?C最多3個(gè)月。對(duì)于更長時(shí)間的儲(chǔ)存,等分并儲(chǔ)存在-20?C
濃度:1 mg/ml。
目標(biāo)的替代名稱:Z DNA;ZDNA
免疫原:Z22是用溴化聚(dG-dC)免疫C57BL/6小鼠制備的。聚(dG-dC)與甲基化牛血清白蛋白(BSA)絡(luò)合,并通過ELISA進(jìn)行篩選。溴化聚(dG dC)。聚(dG-dC)在生理鹽條件下形成穩(wěn)定的Z-DNA螺旋。
特異性:Z22結(jié)合在包括(dG-dC)n在內(nèi)的各種堿基序列的磷酸二酯骨架上識(shí)別Z-DNA。(dG dC)n,(dTdG)n。(dC dA)n,(dG-dme5C)n。(dG-dme5C)n和(dG-dbr5C)n。(dG-dbr5C)n(即與Z-DNA結(jié)合,而與序列無關(guān))。Z22不與B-DNA或ssDNA(單鏈DNA)結(jié)合。DNA-8-MOP產(chǎn)物也可被Z22識(shí)別。Z-DNA是一種左手雙螺旋結(jié)構(gòu),其中大槽和小槽的寬度相差不大,每2個(gè)堿基對(duì)有一個(gè)重復(fù)結(jié)構(gòu)。Z-DNA的形成通常并不有利,但可以通過交替純化嘧啶序列、負(fù)DNA超螺旋或高鹽濃度來促進(jìn)。其生物學(xué)相關(guān)性尚待確定,但形成Z-DNA的潛力與轉(zhuǎn)錄活性區(qū)域相關(guān)?;加邢到y(tǒng)性紅斑狼瘡血清的人和小鼠都含有抗Z-DNA的自身抗體。
應(yīng)用說明:通過SPR測定從原始小鼠IgG2b格式構(gòu)建的Z22 Fab版本與Z-DNA的結(jié)合親和力,表觀KD約為160 nM,可被可溶性溴化d(G-C)15(而非未修飾的d(G-C-)15(B-DNA)競爭。Z22 scFv以與Z22 Fab相似的親和力與目標(biāo)結(jié)合。競爭ELISA用于確定結(jié)合特異性。凝膠阻滯試驗(yàn)也用于顯示Z22與DNA-8-MOP加合物的結(jié)合。添加放射性鏈霉親和素后,使用生物素化Z22測定Z-DNA在經(jīng)滲透、微球包裹的細(xì)胞核中的分布,并與經(jīng)DAPI染色的經(jīng)包裹滲透細(xì)胞核進(jìn)行比較(Wittig等人,1989年)。
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