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Solg™ h-Taq DNA Polymerase說明書

更新時間:2023-03-17      點擊次數(shù):658

Solg™ h-Taq DNA Polymerase說明書


描述: 

Solg™-TaqDNA聚合酶是一種熱啟動PCR酶,通過在大腸桿菌中 表達水熱菌DNA聚合酶基因,處理高純度純化的重組耐熱Taq DNA聚合 酶而產(chǎn)生。在室溫下,化學(xué)處理抑制酶活性,防止非特異性產(chǎn)物或引 物二聚體等非特異性擴增,當溫度達到高溫時,酶重新折疊,恢復(fù)原 有功能。與一般的Taq DNA聚合酶不同,重折疊過程需要更長的酶激 活時間(變性前: 15分鐘)。因此, Solg™-TaqDNA聚合酶對靶基因 具有較高的特異性,適用于SNP和微衛(wèi)星分析。推薦的PCR產(chǎn)物的擴增 長度小于1Kb.

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1.高濃度的模板DNA可以抑制非特異性擴增和PCR擴增反應(yīng)。因此,最大值不要超過200 ng,請參考下表。

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根據(jù)模板類型和濃度進行的PCR循環(huán)

 

2.如果DNA片段具有較高的G+C區(qū)或二級結(jié)構(gòu),則加入5X波段Doctor™可以得到改進的結(jié)果

 

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3.PCR反應(yīng)的一個重要因素是是否只有靶基因被特異性擴增而沒有非特異性擴增。該產(chǎn)物是一種化學(xué)介導(dǎo)的熱啟動P

CR酶,需要在95℃下的酶激活步驟15分鐘。化學(xué)介導(dǎo)的熱啟動PCR酶比使用抗taq抗體的熱啟動酶具有更好的反應(yīng)特

異性,從而降低了非特異性擴增的風險。

 

4.退火溫度按下式計算,一般在55~60℃之間。

AT = Tm – (6 ~ 8 ), Tm = 2 x (A + T) + 4 x (G + C)

 

提示:

>根據(jù)目標大小、引物的Tm值和模板類型,必須控制模板量、延伸時間、退火溫度、Taq量和循環(huán)次數(shù)。

>請保持規(guī)定的儲存溫度恒定,因為PCR效率可能會降低。

>該產(chǎn)品是使用AmpR表達載體生產(chǎn)的。

>如果您在使用此試劑盒時遇到任何問題,請聯(lián)系Solgent。

 


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