淋巴細胞分離液
更新時間:2012-01-14 點擊次數(shù):5274
淋巴細胞分離液
產(chǎn)品編號 | 包裝 | 價格 |
130010-L | 60ml | 86.00 |
130010-L1 | 120ml | 125.00 |
130010-L2 | 200ml | 190.00 |
產(chǎn)品簡介 淋巴細胞分離液是一種根據(jù)細胞密度差異,借助離心產(chǎn)生的重力加速度,進行細胞的分離純化的常用試劑。從外周血、骨髓、外周淋巴器官或各種組織分離出來的細胞是多種細胞的混合物,如要研究某種特定細胞的結(jié)構(gòu)、功能或表面標志等特征,首先要分離純化細胞。根據(jù)細胞的大小、密度、表面荷電、吸附能力或表面抗原的差異可實現(xiàn)對目的細胞的分離、純化,常用的細胞分離與純化方法有密度梯度沉降法、細胞電泳、貼附、親和層析、花環(huán)形成、補體介導(dǎo)殺傷溶解以及流式細胞儀(FCM)和免疫磁珠分選等。密度梯度沉降法是根據(jù)細胞密度差異,借助細胞分離液和離心,進行細胞分離純化的常用方法之一。細胞分離液則是一類能產(chǎn)生一定程度的密度梯度,高密度時粘度不高,濃度不同時滲透壓變化不大,經(jīng)洗滌去除后能用于體外培養(yǎng),而對細胞沒有毒性。zui常用的細胞分離液有Ficoll和Percoll。Ficoll是蔗糖的多聚體,呈中性,吸水性強,平均分子量為400,000,當密度為1.2g/ml仍未超出正常生理性滲透壓,也不穿過生物膜。紅細胞、粒細胞比重大,離心后沉于管底;淋巴細胞和單核細胞的比重小于或等于分層液比重,離心后漂浮于分層液的液面上,也可有少部分細胞懸浮在分層液中。吸取分層液液面的細胞,就可從外周血中分離到單個核細胞。
賽馳生物生產(chǎn)的淋巴細胞分離液(Lymphocytes Separation Medium)以Ficoll和泛影酸鈉為主原材料,配制成密度為1.077的,無菌溶液。該產(chǎn)品適用于人淋巴細胞和大多數(shù)哺乳動物細胞的分離純化,能除去紅細胞和死細胞碎片。
包裝清單 2-8℃避光保存。
使用說明 1.在離心管中加入適量。
2.取抗凝血(無溶血)與等量Hank’s液或平衡鹽溶液充分混勻,用滴管沿管壁緩慢疊加于分層液面上,注意保持兩液面界面清晰,水平離心2000rpm×20分鐘。
3.離心后,管內(nèi)液體分為三層,上層為血漿和Hank’s液,下層主要為紅細胞和粒細胞。中層為,在中上層液面處有一白色云霧層狹窄帶,即為富含淋巴細胞和單核細胞的單個核細胞(PBMC)及血小板。
4.吸去zui上層的血漿,收集血漿層和交界面的單個核細胞,盡量全部吸出PBMC,移入一新的離心管中;
5.加入Hanks’液或無血清培養(yǎng)液,混勻后離心200×g 10分鐘,棄去上清液(低速離心有利于去除細胞懸液中留存的血小板)。
6.再用同樣洗滌液洗滌細胞2次,每次離心500×g 10分鐘,以洗去殘留的。再用
細胞培養(yǎng)液將細胞調(diào)配成適當濃度。通常,每毫升外周血可得1~2×10
6PBMC
產(chǎn)品編號 | 130010-L | 130010-L1 | 130010-L2 |
| 60ml | 120ml | 200ml |
說明書 | 1 份 |
保存條件