??產(chǎn)品基礎(chǔ)信息
- 貨號(hào):78BEA10011
- 中文名:熱不穩(wěn)定性耐高鹽核酸酶(HL-SAN)
- 品牌:BIOHUB
- 規(guī)格:25 kU
- 儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,有效期3年
- 適用領(lǐng)域:病毒載體生產(chǎn)、蛋白純化、mNGS樣本處理等
??詳細(xì)介紹
1?? 產(chǎn)品特性
HL-SAN是一種重組非特異性?xún)?nèi)切酶,由畢赤酵母表達(dá)系統(tǒng)生產(chǎn) 。其核心特性包括:
- 高鹽耐受性:在0.5 M NaCl條件下活性最佳,可耐受高達(dá)1 M NaCl 。
- 快速滅活:通過(guò)添加DTT或TCEP(還原劑)即可不可逆失活,50℃孵育30分鐘滅活率>99% 。
- 廣譜活性:可降解單鏈/雙鏈DNA及RNA,產(chǎn)物為5-7 nt寡核苷酸 。
2?? 技術(shù)參數(shù)
- 比活度:≥175,000 Units/mg(基于小牛胸腺DNA標(biāo)準(zhǔn)) 。
- 酶活定義:37℃下30分鐘消化50 μg/ml DNA(OD260增加1.0) 。
- pH范圍:7.5-9.5(最佳pH 9.0) 。
- Mg2?需求:1-20 mM(最佳濃度5-20 mM) 。
3?? 應(yīng)用場(chǎng)景
- 病毒載體生產(chǎn):AAV/rAAV載體純化中去除宿主DNA,符合FDA<10ng/dose標(biāo)準(zhǔn) 。
- mNGS樣本處理:快速裂解宿主細(xì)胞,提升病原微生物檢出靈敏度(如下呼吸道感染檢測(cè)) 。
- 蛋白純化:清除DNA結(jié)合蛋白雜質(zhì),優(yōu)化下游工藝 。
??核心優(yōu)勢(shì)
? 高鹽環(huán)境下的優(yōu)秀性能
- 常規(guī)核酸酶(如Benzonase)在>100 mM鹽濃度時(shí)失活,而HL-SAN在0.5 M NaCl下活性達(dá)峰值,顯著提升復(fù)雜體系(如AAV裂解液)的核酸去除效率 。
? 智能滅活設(shè)計(jì)
- 通過(guò)添加DTT(1-5 mM)或TCEP(1-10 mM)即可滅活,無(wú)需加熱或超濾,簡(jiǎn)化工藝流程 。
? 合規(guī)性與安全性
- 支持GMP生產(chǎn),提供完整的COA、MSDS及可追溯文件 。
- 不含Triton X-100,符合歐盟環(huán)保法規(guī) 。
? 高性?xún)r(jià)比
- 比活度達(dá)175,000 U/mg,單位成本低于同類(lèi)產(chǎn)品30% 。
?常見(jiàn)問(wèn)題與解答
- Q1:HL - SAN 與普通核酸酶有何區(qū)別?
A1: HL - SAN 專(zhuān)為高鹽設(shè)計(jì),在高鹽濃度下仍能保持高效活性,而普通核酸酶在高鹽環(huán)境下活性會(huì)大幅下降,無(wú)法滿足高鹽條件下去除宿主 DNA 等需求。
- Q2:滅活后是否殘留酶活性?
A2: 添加 10mM DTT 或 TCEP 后,5 分鐘內(nèi)即可實(shí)現(xiàn)不可逆滅活,無(wú)殘留風(fēng)險(xiǎn),這樣就能避免殘留酶對(duì)后續(xù)實(shí)驗(yàn)或生產(chǎn)流程造成干擾。
- Q3:是否支持凍干工藝?
A3: HL - SAN 可凍干保存,復(fù)溶后活性穩(wěn)定,適合長(zhǎng)期儲(chǔ)存,這大大提高了產(chǎn)品的便利性和使用壽命,滿足不同的使用和保存需求。
- Q4:推薦使用濃度是多少?
A4: 宿主 DNA 清除推薦 1000U/ml,不過(guò)具體的使用濃度還需根據(jù)樣本類(lèi)型進(jìn)行適當(dāng)調(diào)整,以達(dá)到最佳的實(shí)驗(yàn)效果。
- Q5:是否適用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞樣本?
A5: 是的,可高效去除哺乳動(dòng)物基因組 DNA,適用于 mNGS 和病原檢測(cè),適用范圍廣泛,能滿足多種實(shí)驗(yàn)和檢測(cè)需求。
- Q6:在病毒載體生產(chǎn)中如何發(fā)揮作用?
A6: 在病毒載體生產(chǎn)如 AAV/AdV 病毒包裝后,能有效清除宿主 DNA,滿足 FDA/NMPA 對(duì) HCD(宿主細(xì)胞 DNA)的嚴(yán)格管控要求,確保病毒載體的質(zhì)量和安全性,對(duì)病毒載體的后續(xù)應(yīng)用和審批等環(huán)節(jié)具有重要意義。
- Q7:在 mNGS 樣本處理中的優(yōu)勢(shì)是什么?
A7: 能去除人體宿主 DNA,從而提升病原微生物檢測(cè)靈敏度,有助于更準(zhǔn)確地檢測(cè)和分析樣本中的病原微生物,為疾病的診斷和治療提供更可靠的依據(jù)。
- Q8:在蛋白純化中的作用機(jī)制是怎樣的?
A8: 可清除 DNA 結(jié)合蛋白,提高目標(biāo)蛋白純度,通過(guò)去除與蛋白結(jié)合的 DNA,減少雜質(zhì)干擾,使目標(biāo)蛋白更容易被純化和分離,提高蛋白純化的效率和質(zhì)量。
- Q9:酶的等電點(diǎn)是多少?
A9: pI 為 9.6,這一特性使其容易跟絕大多數(shù)蛋白分離,方便在復(fù)雜的生物樣品中將酶與其他蛋白成分區(qū)分開(kāi)來(lái),有利于后續(xù)的純化和分析等工作。
- Q10:在不同溫度下的穩(wěn)定性如何?
A10: 熱不穩(wěn)定性耐高鹽核酸酶(HL-SAN)具有熱不穩(wěn)定性,在 37℃環(huán)境下保溫 30 分鐘后活性會(huì)降至 10%,在 42℃環(huán)境下保溫 30 分鐘后活性會(huì)降至 1% 以下,這種熱不穩(wěn)定性特點(diǎn)可在特定的溫度條件下方便地實(shí)現(xiàn)酶的滅活,為實(shí)驗(yàn)流程的控制提供了便利。
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??BIOHUB熱賣(mài)產(chǎn)品
貨號(hào) | 品名 | 規(guī)格 | 品牌 |
LS004197 | Collagenase I 膠原酶I型 | 5g | BIOHUB |
78EE10001 | DMEM高糖 培養(yǎng)基 | 500ml | BIOHUB |
QF119211 | 蛋白快速染色液 Fast SDS-PAGE Protein Staining Buffer | 60ML | BIOHUB |
QFED10001 | 優(yōu)級(jí)胎牛血清(南美) | 10ml | BIOHUB |
LS004189 | Collagenase IV膠原酶IV型 | 5g | BIOHUB |
78CH10001 | Skim milk powder脫脂奶粉(WB專(zhuān)用) | 500g | BIOHUB |
78DC10167 | TGIRT-III Reverse Transcriptase | 500pmol | BIOHUB |
78BC10051 | Collagen | 3x0.5mL | BIOHUB |
78SA10001 | 組織細(xì)胞保存液 | 100ml | BIOHUB |
78EA10007 | 脂質(zhì)過(guò)氧化傳感器 | 0.5mg | BIOHUB |
78BC10002 | 牛血清白蛋白 | 100g | BIOHUB |
78LUCA1001 | D-熒光素鉀鹽 | 25mg | BIOHUB |
78DA10137 | Rat Anti-Mouse GPIIb/IIIa Monoclonal Antibody ,PE | 0.5mL | BIOHUB |
78GG10160 | RPMI 1640 Mediumm | 500mL | BIOHUB |
78SL0001 | DPBS(1×, 無(wú)鈣鎂,無(wú)菌) | 500ml | BIOHUB |
78BB10003 | Biohub Red核酸染料 | 0.5ml | BIOHUB |
78ED10009 | 四環(huán)素陰性胎牛血清 | 500ml | BIOHUB |
78LUCA1003 | 牛II型膠原(免疫級(jí)別) | 100mg | BIOHUB |
78CA10024 | GVB° (GVB without Ca++ and Mg++) | 250mL | BIOHUB |
78OA10016 | TMB顯色終止液450 | 500mL | BIOHUB |
78GJ10008 | 鳥(niǎo)苷-3',5'-四磷酸, 鋰鹽(ppGpp) | 10uL | BIOHUB |
LS004180 | Collagenase III 膠原酶III型 | 100mg | BIOHUB |
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