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膠原酶 I II III IV四個型之間區(qū)別及用法

更新時間:2015-12-17      點擊次數:70680

消化法中常使用的酶有3種:胰蛋白酶、膠原酶I以及透明質酸酶,透明質酸酶多與胰蛋白酶或膠原酶聯(lián)合應用; 膠原酶作用較緩和,能消化細胞間質中的膠原纖維以釋放細胞,對細胞損傷小,以膠原I為主。

胰蛋白酶(簡稱胰酶)是廣泛應用的消化劑.胰蛋白酶是一種胰臟制品,對蛋白質有水介作用,主要作用于賴氨酸或精氨酸相連接的肽鍵,使細胞間質中的蛋白質水介而使細胞分散開,在常用的蛋白酶中由于產品的活力和純度不同,對細胞的消化能力也不同,胰蛋白酶對細胞的作用,取決于細胞類型、酶的活力、配制的濃度、消化的溫度、無機鹽離子、pH以及消化時間的長短等. 胰蛋白酶作用較強,容易造成平滑肌細胞損壞;
膠原酶是一種從細菌中提取出來的酶,對膠原有很強的消化作用.適于消化纖維性組織、上皮組織以及癌組織,它對細胞間質有較好的消化作用,對細胞本身影響不大,可使細胞與膠原成分脫離而不受傷害.該酶分離效果好,即使有鈣、鎂離子存在仍有活性,故可用PBS和含血清的培養(yǎng)液配制,即操作簡便又可提高細胞成活率,zui終濃度200u/mL  此酶消化作用緩和,無需機械振蕩,但膠原酶價格較高,大量使用將增加實驗成本,所以選擇價廉物美的膠原酶是關鍵,所以不光要看重量還要看每MG的活性單位.

 

膠原酶的化學名為膠原蛋白水解酶(Collagenase),它能在生理PH和溫度條件下特異性地水解天然膠原蛋白的三維螺旋結構,而不損傷其它蛋白質和組織。膠原酶的化學本質是一種蛋白質,因此,這對溫度、PH和導致蛋白質變性的各種因素均非常敏感,極易受到外界條件的影響而改變其本身的構象和性質。

膠原酶(collagenase)是從溶組織梭狀細胞芽孢桿菌提取制備的,主要水解結締組織中膠原蛋白成分。當擬消化的組織較硬,內含較多結締組織或膠原成分時,用胰蛋白酶解離細胞的效果較差,這時可采用膠原酶解離細胞法。 膠原酶僅對細胞間質有消化作用而對上皮細胞影響不大。因此適于消化分離纖維性組織、上皮及癌組織,可使上皮細胞與膠原成分分離而不受損害。常用劑量為zui終濃度200U/ml。膠原酶分為Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ型以及肝細胞膠原酶,要根據所要分離消化的組織類型選擇膠原酶類型。

中文名稱: I型膠原酶、II型膠原酶、IV型膠原酶、V型膠原酶

英文名稱:Collagenase I、Collagenase II、Collagenase IV、Collagenase V

CAS號: 9001-12-1

規(guī)格:100mg, 1g ,5

產地:Worthington sigma  invitrogen

外觀: 棕色或棕褐色結晶狀凍干粉;

保存:-20°C

膠原酶配制方法和胰蛋白酶的配制方法一致,只是要注意標簽中的活性單位,zui終配制 成為200u/mL就可以了.,

胰蛋白酶的配制、過濾除菌與分裝過程

準備樣品:干粉,PBS緩沖液,離心管兩個、凍存管20個、盒子一個、槍頭1盒、滅菌器、注射器。

準備工作:將離心管、凍存管裝載盒子中高溫高壓滅菌。

配制:

1.稱取胰蛋白酶:按胰蛋白酶液濃度0.25%用電子天平準確稱取粉劑50mg溶入離心管PBS(PH到7.2左右)液中。攪拌混勻,置于4℃內12小時。

2.用注射濾器抽濾消毒:配好的胰酶溶液要在超凈臺內用注射濾器(0.22微米微孔濾膜)抽濾除菌。

3.分裝:將除菌之后的胰蛋白酶用移液槍分裝至

 

 

 

 

A: Collagenase I(膠原酶I型) :  主要用于上皮、肺、脂肪和腎上腺組織細胞的分離。

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LS004194

Collagenase I(膠原酶I型)

100 mg

476

Worthington

LS004196

Collagenase I(膠原酶I型)

1 gm

2464

Worthington

LS004197

Collagenase I(膠原酶I型)

5 gm

10360

Worthington

17100-017

Collagenase I(膠原酶I型)

1g

3025

invitrogen

C0130-100MG

Collagenase I(膠原酶I型)

100mg

526.5

sigma

C0130-500MG

Collagenase I(膠原酶I型)

500MG

1473.03

sigma

C0130-1G

Collagenase I(膠原酶I型)

1G

2208.96

sigma

C0130-5G

Collagenase I(膠原酶I型)

5G

6113.25

sigma

 

 

B: Collagenase II(膠原酶II型) : 適用于肝臟,骨,甲狀腺,心臟和唾液腺組織細胞的分離。

 

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LS004177

Collagenase II(膠原酶II型)

5 gm

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Worthington

LS004176

Collagenase II(膠原酶II型)

1 gm

2464

Worthington

LS004174

Collagenase II(膠原酶II型)

100 mg

476

Worthington

17101-015

Collagenase II(膠原酶II型)

1g

3025

invitrogen

C6885-25MG

Collagenase II(膠原酶II型)

25MG

508.95

sigma

C6885-100MG

Collagenase II(膠原酶II型)

100mg

778.05

sigma

C6885-500MG

Collagenase II(膠原酶II型)

500MG

1,980.81

sigma

C6885-1G

Collagenase II(膠原酶II型)

1G

2,971.80

sigma

C6885-5G

Collagenase II(膠原酶II型)

5G

7,926.75

sigma

 

 

C: Collagenase III(膠原酶 III型) 對哺乳動物的組織有廣譜的消化作用

 

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LS004182

Collagenase III(膠原酶 III型)

1 gm

2464

Worthington

LS004183

Collagenase III(膠原酶III型)

5 gm

10360

Worthington

LS004180

Collagenase III(膠原酶III型)

100 mg

476

Worthington

 

 

D: Collagenase IV(膠原酶IV型):膠原酶Ⅳ包含至少7中蛋白酶成分,分子量從68-130KD不等。它能消化多種組織, 對哺乳動物的組織有廣譜的消化作用。

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17104-019

Collagenase IV(膠原酶IV型)

1g

3025

invitrogen

C5138-25MG

Collagenase IV(膠原酶IV型)

25MG

452.79

sigma

C5138-100MG

Collagenase IV(膠原酶IV型)

100mg

772.20

sigma

C5138-500MG

Collagenase IV(膠原酶IV型)

500MG

2,530.71

sigma

C5138-1G

Collagenase IV(膠原酶IV型)

1G

4,095.00

sigma

C5138-5G

Collagenase IV(膠原酶IV型)

5G

15,420.60

sigma

LS004189

Collagenase IV(膠原酶V型)

5 gm

10360

Worthington

LS004188

Collagenase IV(膠原酶V型)

1 gm

2464

Worthington

LS004186

Collagenase IV(膠原酶V型)

100 mg

476

Worthington

 

E: Collagenase V(膠原酶V型): 膠原酶Ⅴ包含至少7中蛋白酶成分,分子量從68-130KD不等。它可用于胰腺小島組織的分離,結締組織分離。

 

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LS005283

Collagenase V(膠原酶V型)

5 gm

12460

Worthington

LS005282

Collagenase V(膠原酶V型)

1 gm

2968

Worthington

LS005280

Collagenase V(膠原酶V型)

100 mg

588

Worthington

C9263-25MG

Collagenase V(膠原酶V型)

25MG

469.17

sigma

C9263-100MG

Collagenase V(膠原酶V型)

100mg

625.95

sigma

C9263-500MG

Collagenase V(膠原酶V型)

500MG

1,814.67

sigma

C9263-1G

Collagenase V(膠原酶V型)

1G

2,845.44

sigma

C9263-5G

Collagenase V(膠原酶V型)

5G

5,686.20

sigma

 

我們公司zui大優(yōu)勢是強大的采購,

1:基本什么都能進口,血清,抗體,耗材,還有部分限制進口的,

2: 貨品全,現經營過700多個品牌,基本所有生物試劑耗材都可以進口,特別是冷偏的產品那就更有優(yōu)勢,

3:提供加急服務,一般1-2周到貨,超過時限加急費全免

4:價格公道,絕大部分價格有優(yōu)勢,當然不能保證100%產品都有價格優(yōu)勢,

5:良好的信譽,大部分客戶我們提供貨到付款服務,客戶包括清華,北大 交大 復旦,中山等100多所大學,ROCHE,阿斯利康,國藥 ,fisher等500多家公司

6:我們還是santa,Advanced Biotechnologies Inc;Athens Research & Technology, bangs, BBInternational, crystalchem, dianova, FD Neurotechnologies, Inc. FormuMax Scientific, Inc; Genebridege; Glycotope Biotechnology GmbH; iduron; Innovative Research of America; Ludger  neuroprobe; omicronbio; Polysciences; prospecbi; QA-BIO;quickzyme;RESEARCH DIETS, INC;sterlitech;sysy;TriLink BioTechnologies, Inc;worthington-biochem;zyagen;......幾十家國外公司授權代理
7:我們還從事invitrogen,qiagen; abcam ;sigma;neb; roche;merck; rnd; BD; GE; pierce; BioLegend....等*批發(fā)

 

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